Μετάβαση στο περιεχόμενο
mIMCD-3
Ιστός
Νεφρό, εσωτερικός μυελοειδής συλλεκτικός αγωγός
Ασθένεια
Κανονικό
Συνώνυμα
mIMCD3, IMCD-3, IMCD3, mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

Έγγραφα

mIMCD-3

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305382

The mIMCD-3 cell line is derived from the murine inner medullary collecting duct and is widely used as a model for studying renal epithelial cell biology,...

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά mIMCD-3 προέρχεται από τον εσωτερικό μυελοειδή συλλεκτικό αγωγό ποντικού και χρησιμοποιείται ευρέως ως μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας των νεφρικών επιθηλιακών κυττάρων, της ανάπτυξης των νεφρών και της παθοφυσιολογίας. Αυτή η αθανατοποιημένη κυτταρική σειρά παρουσιάζει χαρακτηριστικά τυπικά του συλλεκτικού αγωγού, συμπεριλαμβανομένης της ικανότητας να σχηματίζει σωληνοειδείς δομές σε συστήματα καλλιέργειας 3D και της έκφρασης πρωτεϊνών στενών συνδέσεων, ακουαπορινών και επιθηλιακών δεικτών. Τα κύτταρα mIMCD-3 είναι ιδιαίτερα πολύτιμα για τη διερεύνηση των μηχανισμών μεταφοράς ιόντων, της ρύθμισης του νερού και της κυτταρικής απόκρισης στο μηχανικό στρες, γεγονός που τα καθιστά απαραίτητο εργαλείο στην έρευνα της νεφρολογίας.

Τα κύτταρα mIMCD-3 έχουν χρησιμοποιηθεί σε μελέτες της πολυκυστικής νεφροπάθειας (PKD) για την κατανόηση της μοριακής βάσης του σχηματισμού κύστεων. Συγκεκριμένα, αυτή η κυτταρική σειρά έχει υποστεί γενετική τροποποίηση για τη διερεύνηση του ρόλου των πρωτεϊνών πολυκυστίνης (PKD1 και PKD2), οι οποίες διαδραματίζουν καθοριστικό ρόλο στην αυτοσωματική κυρίαρχη πολυκυστική νεφροπάθεια (ADPKD). Για παράδειγμα, τα κύτταρα mIMCD-3 που στερούνται PKD1 εμφανίζουν ανώμαλη διαστολή των σωληναρίων υπό μηχανική καταπόνηση, μιμούμενα την κυστογένεση που παρατηρείται σε ασθενείς με PKD. Επιπλέον, πειράματα με κύτταρα mIMCD-3 έχουν καταδείξει τον ρόλο των πρωτογενών κιλίων στη μεσολάβηση της σηματοδότησης του cAMP και της μηχανικής μεταγωγής, διαδικασίες κρίσιμες για τη λειτουργία του νεφρικού επιθηλίου και την παθολογία της νόσου.

Αυτή η κυτταρική σειρά χρησιμοποιείται επίσης στην ανακάλυψη και τη δοκιμή φαρμάκων, ιδίως στο πλαίσιο της νεφροτοξικότητας και των θεραπειών που στοχεύουν ειδικά στα νεφρά. Τα κύτταρα mIMCD-3 παρέχουν μια πλατφόρμα για τη μελέτη των αντιδράσεων σε χημειοθεραπευτικούς παράγοντες όπως η σισπλατίνη, η οποία μπορεί να προκαλέσει οξειδωτικό στρες και απόπτωση στα νεφρικά κύτταρα. Επιπλέον, τα ισχυρά χαρακτηριστικά ανάπτυξής τους και η αναπαραγωγιμότητά τους σε συνθήκες καλλιέργειας καθιστούν τα κύτταρα mIMCD-3 ένα ευέλικτο μοντέλο για τη διερεύνηση ποικίλων πτυχών της νεφρικής βιολογίας και για την προώθηση θεραπευτικών προσεγγίσεων στις νεφρικές παθήσεις.

Ιστός
Νεφρό, εσωτερικός μυελοειδής συλλεκτικός αγωγός
Ασθένεια
Κανονικό
Συνώνυμα
  • mIMCD3
  • IMCD-3
  • IMCD3
  • mouse Inner Medullary Collecting Duct-3

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This murine inner medullary collecting duct cell line (mIMCD-3) contains an SV40 T-Antigen transgene derived from a transgenic mouse model, supporting immortalization. The construct is stably present in primary kidney-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
2

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
mIMCD-3 (αριθμός καταλόγου Cytion 305382)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_0429

05Έκφραση και ευαισθησία

Ιοί
Μετασχηματιστής: Simian virus 40 (SV40)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 × 10⁴ κύτταρα/cm²
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 2 έως 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
Tg(SV40E)Bri/7 διαγονιδιακά
Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων