SVG p12

SVG p12, fetal beyin dokusundan elde edilen ve SV40 büyük T antijeni ile transformasyon yoluyla ölümsüzleştirilen bir insan fetal glial hücre hattıdır. Glial kökenli olması ve viral enfeksiyona karşı yüksek toleransı nedeniyle, nörotropik poliomavirüsleri, özellikle JC poliomavirüsü (JCPyV) incelemek için yaygın olarak kullanılan bir modeldir. SVG p12, astrositik soyun özelliklerini korur ve JCPyV'nin üretken enfeksiyonunu ve yayılmasını destekler, bu da onu glial hücrelerde viral tropizm, replikasyon ve patogenezi incelemek için standart bir in vitro sistem haline getirir.

Ancak, sonraki analizler SVG p12'nin hücre depolarına yerleştirildikten sonra BK poliomavirüs (BKPyV) ile kontamine olduğunu ortaya çıkarmıştır. Bazı kültür koleksiyonlarından elde edilen SVG p12 hatlarında BKPyV DNA'sı ve bulaşıcı virüsün saptanması, bu hücrelerden elde edilen deneysel verilerin bütünlüğü konusunda endişelere yol açmıştır. Kontaminasyon, SVG-A gibi klonların BKPyV testi negatif çıktığı için tüm SVG türevi hatlara yayılmamıştır, bu da kontaminasyonun hücre hattının orijinal türetilmesi sırasında değil, işleme veya dağıtım sırasında meydana geldiğini düşündürmektedir.

Yaygın kullanımı ve poliomavirüs enfeksiyonuna karşı güçlü tepkisi nedeniyle, SVG p12, özellikle insan nörovirolojisi bağlamında, viroloji araştırmalarında önemli bir araç olmaya devam etmektedir. Bununla birlikte, bu hücre hattını kullanan araştırmacıların, deneylerin tekrarlanabilirliğini ve verilerin güvenilirliğini sağlamak için stoklarında BKPyV kontaminasyonu olmadığını doğrulamaları önerilmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın