SVG p12

SVG p12 es una línea celular glial fetal humana derivada originalmente de tejido cerebral fetal e inmortalizada mediante transformación con el antígeno T grande del SV40. Se ha utilizado ampliamente como modelo para estudiar los poliomavirus neurotrópicos, en particular el poliomavirus JC (JCPyV), debido a su origen glial y a su alta permisividad para la infección viral. SVG p12 conserva las características del linaje astrocítico y permite la infección productiva y la propagación del JCPyV, lo que la convierte en un sistema in vitro estándar para estudiar el tropismo viral, la replicación y la patogénesis en las células gliales.

Sin embargo, análisis posteriores han revelado que la línea SVG p12 se contaminó con el poliomavirus BK (BKPyV) después de haber sido depositada en repositorios de células. La detección de ADN del BKPyV y de virus infeccioso en líneas de SVG p12 adquiridas de algunas colecciones de cultivos ha suscitado inquietudes respecto a la integridad de los datos experimentales derivados de estas células. La contaminación no se extiende a todas las líneas derivadas de SVG, ya que clones como el SVG-A han dado negativo en las pruebas de BKPyV, lo que sugiere que la contaminación ocurrió durante el manejo o la distribución, y no durante la derivación original de la línea celular.

Debido a su uso consolidado y a su sólida respuesta a la infección por poliomavirus, la línea SVG p12 sigue siendo una herramienta clave en la investigación virológica, particularmente en el contexto de la neurovirología humana. No obstante, ahora se recomienda que los investigadores que utilicen esta línea celular verifiquen la ausencia de contaminación por BKPyV en sus reservas para garantizar la reproducibilidad experimental y la confiabilidad de los datos.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.