SVG p12

SVG p12 ir cilvēka augļa gliozīdu šūnu līnija, kas sākotnēji iegūta no augļa smadzeņu audiem un imortalizēta, transformējot ar SV40 lielā T antigēna palīdzību. Tā ir plaši izmantota kā modelis neirotropisko poliomavīrusu, jo īpaši JC poliomavīrusa (JCPyV), pētīšanai, pateicoties tās gliozīdu izcelsmei un augstajai virsējas infekcijas pieļaujamībai. SVG p12 saglabā astrocitāro šūnu līnijas īpašības un atbalsta produktīvu infekciju un JCPyV izplatīšanos, padarot to par standarta in vitro sistēmu vīrusu tropisma, replikācijas un patogēnēzes pētīšanai glijas šūnās.

Tomēr turpmāka analīze atklāja, ka SVG p12 bija inficēts ar BK poliomavīrusu (BKPyV) pēc noguldīšanas šūnu krātuvēs. BKPyV DNS un infekciozā vīrusa atklāšana SVG p12 līnijās, kas iegūtas no dažām kultūru kolekcijām, ir izraisījusi bažas par eksperimentālo datu integritāti, kas iegūti no šīm šūnām. Piesārņojums neattiecas uz visām SVG atvasinātajām līnijām, jo kloni, piemēram, SVG-A, ir testēti negatīvi attiecībā uz BKPyV, kas liecina, ka piesārņojums radās apstrādes vai izplatīšanas laikā, nevis šūnu līnijas sākotnējās atvasināšanas laikā.

Pateicoties tā plašajai izmantošanai un spēcīgajai reaģētspējai uz poliomavīrusa infekciju, SVG p12 joprojām ir galvenais instruments viroloģijas pētījumos, jo īpaši cilvēka neiroviroloģijas kontekstā. Tomēr tagad pētniekiem, kuri izmanto šo šūnu līniju, ieteicams pārbaudīt, vai to krājumos nav BKPyV kontaminācijas, lai nodrošinātu eksperimentu reproducējamību un datu uzticamību.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu