SVG p12

SVG p12 è una linea cellulare gliale fetale umana originariamente derivata dal tessuto cerebrale fetale e immortalizzata tramite trasformazione con l'antigene T grande SV40. È stata ampiamente utilizzata come modello per lo studio dei poliomavirus neurotropici, in particolare il poliomavirus JC (JCPyV), grazie alla sua origine gliale e all'elevata permissività per l'infezione virale. SVG p12 conserva le caratteristiche della linea astrocitica e supporta l'infezione produttiva e la propagazione del JCPyV, rendendolo un sistema in vitro standard per lo studio del tropismo virale, della replicazione e della patogenesi nelle cellule gliali.

Tuttavia, analisi successive hanno rivelato che SVG p12 era contaminato dal poliomavirus BK (BKPyV) dopo essere stato depositato in banche di cellule. Il rilevamento del DNA del BKPyV e del virus infettivo nelle linee SVG p12 acquisite da alcune collezioni di colture ha sollevato preoccupazioni riguardo all'integrità dei dati sperimentali derivati da queste cellule. La contaminazione non si estende a tutte le linee derivate da SVG, poiché cloni come SVG-A sono risultati negativi al BKPyV, suggerendo che la contaminazione si sia verificata durante la manipolazione o la distribuzione, piuttosto che durante la derivazione originale della linea cellulare.

Grazie al suo uso consolidato e alla sua forte reattività all'infezione da poliomavirus, SVG p12 rimane uno strumento fondamentale nella ricerca virologica, in particolare nel contesto della neurovirologia umana. Tuttavia, si raccomanda ora ai ricercatori che utilizzano questa linea cellulare di verificare l'assenza di contaminazione da BKPyV nelle loro scorte per garantire la riproducibilità sperimentale e l'affidabilità dei dati.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia