Siirry sisältöön
SVG p12
Kudos
Sikiön aivot
Synonyymit
SVGp12, SVG(P12)

Asiakirjat

SVG p12

Cell line · Tuotenumero 305878

SVG p12 is a human fetal glial cell line originally derived from fetal brain tissue and immortalized via transformation with SV40 large T antigen. It has ...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SVG p12 on ihmisen sikiön glia-solulinja, joka on peräisin sikiön aivokudoksesta ja ikuistettu SV40-suuren T-antigeenin avulla. Sitä on käytetty laajalti mallina neurotrooppisten polyomavirusten, erityisesti JC-polyomaviruksen (JCPyV), tutkimuksessa, koska se on peräisin glia-soluista ja hyvin alttiina virusinfektioille. SVG p12 säilyttää astrosyyttisen sukupolven ominaisuudet ja tukee JCPyV:n tuottavaa infektiota ja leviämistä, mikä tekee siitä standardin in vitro -järjestelmän glia-solujen virustropismin, replikaation ja patogeneesin tutkimiseen.

Myöhemmät analyysit ovat kuitenkin paljastaneet, että SVG p12 oli saastunut BK-polyomaviruksella (BKPyV) sen jälkeen, kun se oli talletettu soluvarastoihin. BKPyV-DNA:n ja tarttuvan viruksen havaitseminen joistakin viljelmäkokoelmista hankituissa SVG p12 -linjoissa on herättänyt huolta näistä soluista saatujen kokeellisten tietojen luotettavuudesta. Saastuminen ei koske kaikkia SVG-peräisiä linjoja, sillä SVG-A:n kaltaiset kloonit ovat testanneet negatiiviseksi BKPyV:lle, mikä viittaa siihen, että saastuminen on tapahtunut käsittelyn tai jakelun aikana eikä solulinjan alkuperäisen johdannon aikana.

Vakiintuneen käytönsä ja vahvan reagoivuutensa polyomavirusinfektioon ansiosta SVG p12 on edelleen keskeinen työkalu virologisessa tutkimuksessa, erityisesti ihmisen neurovirologian alalla. Siitä huolimatta suositellaan nyt, että tätä solulinjaa käyttävät tutkijat varmistavat, että heidän varastoissaan ei ole BKPyV-kontaminaatiota, jotta kokeiden toistettavuus ja tietojen luotettavuus voidaan varmistaa.

Kudos
Sikiön aivot
Synonyymit
  • SVGp12
  • SVG(P12)

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This human fetal glial cell line (SVG p12) contains SV40 Large T-Antigen sequences with an ori mutation and is additionally contaminated with BK polyomavirus strain UT, without deliberate genetic engineering of the contaminant. The SV40 insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastit
Solutyyppi
Astrosyytit

04Tunnisteet

Lähdeviite
SVG p12 (Cytion-tuotenumero 305878)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_3797

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
8–12 sikiön viikko
Etnisyys
Määrittelemätön