SVG p12

La lignée cellulaire SVG p12 est une lignée de cellules gliales fœtales humaines issue à l’origine de tissu cérébral fœtal et immortalisée par transformation avec l’antigène T de grande taille du SV40. Elle est largement utilisée comme modèle pour l’étude des polyomavirus neurotropes, en particulier le polyomavirus JC (JCPyV), en raison de son origine gliale et de sa grande permissivité à l’infection virale. La lignée SVG p12 conserve les caractéristiques de la lignée astrocytaire et permet une infection productive ainsi que la propagation du JCPyV, ce qui en fait un système in vitro de référence pour l’étude du tropisme viral, de la réplication et de la pathogenèse dans les cellules gliales.

Cependant, des analyses ultérieures ont révélé que la lignée SVG p12 avait été contaminée par le polyomavirus BK (BKPyV) après son dépôt dans des banques de cellules. La détection d’ADN du BKPyV et de virus infectieux dans des lignées SVG p12 provenant de certaines collections de cultures a soulevé des inquiétudes quant à l’intégrité des données expérimentales issues de ces cellules. La contamination ne touche pas toutes les lignées dérivées de SVG, puisque des clones tels que SVG-A se sont révélés négatifs pour le BKPyV, ce qui suggère que la contamination s’est produite lors de la manipulation ou de la distribution, plutôt que lors de la dérivation initiale de la lignée cellulaire.

En raison de son utilisation bien établie et de sa forte réactivité à l’infection par les polyomavirus, la lignée SVG p12 demeure un outil clé dans la recherche en virologie, en particulier dans le contexte de la neurovirologie humaine. Néanmoins, il est désormais recommandé aux chercheurs utilisant cette lignée cellulaire de vérifier l’absence de contamination par le BKPyV dans leurs stocks afin d’assurer la reproductibilité des expériences et la fiabilité des données.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.