SVG p12

SVG p12 הוא קו תאים גליאליים עובריים אנושיים שמקורם ברקמת מוח עוברית והונצחו באמצעות טרנספורמציה עם אנטיגן T גדול SV40. הוא נמצא בשימוש נרחב כמודל לחקר פוליומאווירוסים נוירוטרופיים, ובפרט פוליומאווירוס JC (JCPyV), בשל מקורו הגליאלי והסובלנות הגבוהה שלו לזיהום נגיפי. SVG p12 שומר על מאפייני השושלת האסטרוציטית ותומך בזיהום פרודוקטיבי ובהתפשטות של JCPyV, מה שהופך אותו למערכת סטנדרטית במבחנה לחקר טרופיזם נגיפי, שכפול ופתוגנזה בתאי גליה.

עם זאת, ניתוחים מאוחרים יותר גילו כי SVG p12 זוהם בנגיף הפוליומה BK (BKPyV) לאחר שהופקד במאגרי תאים. איתור DNA של BKPyV ונגיף מדבק בקווי SVG p12 שנרכשו ממספר אוספי תרבית עורר חששות לגבי תקינות הנתונים הניסויים שהופקו מתאים אלה. הזיהום אינו משתרע על כל הקווים שמקורם ב-SVG, שכן שיבוטים כגון SVG-A נבדקו ונמצאו שליליים ל-BKPyV, מה שמרמז כי הזיהום התרחש במהלך הטיפול או ההפצה, ולא במהלך ההפקת המקורית של קו התאים.

בשל השימוש המוכח בו ותגובתו החזקה לזיהום בפוליאומווירוס, SVG p12 נותר כלי מרכזי במחקר הווירולוגי, במיוחד בהקשר של נוירו-וירולוגיה אנושית. עם זאת, כעת מומלץ לחוקרים המשתמשים בקו תאים זה לוודא את היעדר זיהום BKPyV במלאי שלהם, כדי להבטיח את השחזור הניסויי ואת אמינות הנתונים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו