SVG p12

Az SVG p12 egy emberi magzati glia sejtvonal, amely eredetileg magzati agyszövetből származik, és SV40 nagy T antigénnel történő transzformációval immortális lett. Glia eredete és a vírusfertőzés iránti magas fogékonysága miatt széles körben használják neurotróp poliovírusok, különösen a JC poliovírus (JCPyV) tanulmányozásának modelljeként. Az SVG p12 megőrzi az asztrociták vonalának jellemzőit, és támogatja a JCPyV produktív fertőzését és szaporodását, így standard in vitro rendszerré vált a glia sejtekben történő vírus tropizmus, replikáció és patogenezis tanulmányozásához.

A későbbi elemzések azonban kimutatták, hogy az SVG p12 sejtvonalat BK poliovírussal (BKPyV) szennyezték, miután azt sejtbankokba helyezték. A BKPyV DNS és a fertőző vírus kimutatása egyes tenyészetgyűjteményekből származó SVG p12 vonalakban aggodalmakat vetett fel a ezekből a sejtekből származó kísérleti adatok integritását illetően. A szennyeződés nem terjed ki az összes SVG-ből származó vonalra, mivel az SVG-A-hoz hasonló klónok BKPyV-re negatívak voltak, ami arra utal, hogy a szennyeződés a sejtvonal eredeti származása során, hanem inkább a kezelés vagy a forgalmazás során következett be.

Mivel használata már régóta bevett gyakorlat, és erőteljesen reagál a poliomavírus-fertőzésre, az SVG p12 továbbra is kulcsfontosságú eszköz a virológiai kutatásokban, különösen az emberi neurovirológia területén. Mindazonáltal most már ajánlott, hogy az ezt a sejtvonalat használó kutatók ellenőrizzék, hogy készleteikben nincs-e BKPyV-fertőzés, hogy biztosítsák a kísérletek reprodukálhatóságát és az adatok megbízhatóságát.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban