SVG p12

SVG p12 é uma linha celular glial fetal humana originalmente derivada de tecido cerebral fetal e imortalizada por meio da transformação com o antígeno T grande SV40. Tem sido amplamente utilizada como modelo para o estudo de poliomavírus neurotrópicos, particularmente o poliomavírus JC (JCPyV), devido à sua origem glial e alta permissividade para infecção viral. O SVG p12 mantém as características da linhagem astrocítica e suporta a infecção produtiva e a propagação do JCPyV, tornando-o um sistema in vitro padrão para o estudo do tropismo viral, replicação e patogénese em células gliais.

No entanto, análises subsequentes revelaram que o SVG p12 foi contaminado com o poliomavírus BK (BKPyV) após ser depositado em repositórios de células. A deteção do ADN do BKPyV e do vírus infeccioso nas linhas SVG p12 adquiridas de algumas coleções de culturas levantou preocupações quanto à integridade dos dados experimentais derivados dessas células. A contaminação não se estende a todas as linhas derivadas do SVG, uma vez que clones como o SVG-A apresentaram resultados negativos para o BKPyV, sugerindo que a contaminação ocorreu durante o manuseamento ou a distribuição, e não durante a derivação original da linha celular.

Devido ao seu uso estabelecido e resposta robusta à infecção por poliomavírus, o SVG p12 continua a ser uma ferramenta fundamental na investigação virológica, particularmente no contexto da neurovirologia humana. No entanto, recomenda-se agora que os investigadores que utilizam esta linha celular verifiquem a ausência de contaminação por BKPyV nos seus stocks para garantir a reprodutibilidade experimental e a fiabilidade dos dados.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia