SVG p12

SVG p12 е човешка фетална глиална клетъчна линия, първоначално получена от фетална мозъчна тъкан и увековечена чрез трансформация с голям Т антиген SV40. Тя се използва широко като модел за изучаване на невротропни полиомавируси, по-специално JC полиомавирус (JCPyV), поради глиалния си произход и високата си податливост към вирусна инфекция. SVG p12 запазва характеристиките на астроцитната линия и поддържа продуктивна инфекция и разпространение на JCPyV, което го прави стандартна in vitro система за изучаване на вирусен тропизъм, репликация и патогенеза в глиални клетки.

Въпреки това, последващ анализ разкри, че SVG p12 е бил замърсен с BK полиомавирус (BKPyV) след депозирането му в клетъчни хранилища. Откриването на BKPyV ДНК и инфекциозен вирус в линии SVG p12, придобити от някои културни колекции, породи опасения относно целостта на експерименталните данни, получени от тези клетки. Заразяването не се простира върху всички линии, произхождащи от SVG, тъй като клони като SVG-A са дали отрицателни резултати за BKPyV, което предполага, че заразяването е настъпило по време на обработката или разпространението, а не по време на първоначалното получаване на клетъчната линия.

Благодарение на утвърдената си употреба и силна реактивност към полиомавирусна инфекция, SVG p12 остава ключов инструмент в вирусологичните изследвания, особено в контекста на човешката невровирусология. Въпреки това, сега се препоръчва изследователите, които използват тази клетъчна линия, да проверяват отсъствието на BKPyV замърсяване в своите запаси, за да гарантират възпроизводимостта на експериментите и надеждността на данните.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация