SVG p12

Το SVG p12 είναι μια ανθρώπινη εμβρυϊκή γλοιακή κυτταρική σειρά που προέρχεται αρχικά από εμβρυϊκό εγκεφαλικό ιστό και έχει αθανατοποιηθεί μέσω μετασχηματισμού με το μεγάλο Τ αντιγόνο SV40. Έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως ως μοντέλο για τη μελέτη νευροτροπικών πολυομαϊών, ιδιαίτερα του JC πολυομαϊού (JCPyV), λόγω της γλοιακής του προέλευσης και της υψηλής επιδεκτικότητας σε ιογενή λοίμωξη. Το SVG p12 διατηρεί τα χαρακτηριστικά της αστροκυτταρικής καταγωγής και υποστηρίζει την παραγωγική μόλυνση και διάδοση του JCPyV, καθιστώντας το ένα τυπικό in vitro σύστημα για τη μελέτη του ιικού τροπισμού, της αναπαραγωγής και της παθογένειας στα γλοιακά κύτταρα.

Ωστόσο, μεταγενέστερη ανάλυση αποκάλυψε ότι το SVG p12 είχε μολυνθεί με τον πολυομάρο ιό BK (BKPyV) μετά την κατάθεσή του σε αποθετήρια κυττάρων. Η ανίχνευση του DNA του BKPyV και του μολυσματικού ιού σε σειρές SVG p12 που αποκτήθηκαν από ορισμένες συλλογές καλλιεργειών έχει εγείρει ανησυχίες σχετικά με την ακεραιότητα των πειραματικών δεδομένων που προέρχονται από αυτά τα κύτταρα. Η μόλυνση δεν επεκτείνεται σε όλες τις σειρές που προέρχονται από SVG, καθώς κλώνοι όπως το SVG-A έχουν δοκιμαστεί αρνητικά για BKPyV, υποδηλώνοντας ότι η μόλυνση συνέβη κατά τη διάρκεια του χειρισμού ή της διανομής, και όχι κατά τη διάρκεια της αρχικής προέλευσης της κυτταρικής σειράς.

Λόγω της καθιερωμένης χρήσης του και της ισχυρής ανταπόκρισής του στη μόλυνση από πολυομαϊό, το SVG p12 παραμένει ένα βασικό εργαλείο στην έρευνα της ιολογίας, ιδιαίτερα στο πλαίσιο της ανθρώπινης νευροϊολογίας. Ωστόσο, συνιστάται πλέον στους ερευνητές που χρησιμοποιούν αυτή τη κυτταρική σειρά να επαληθεύουν την απουσία μόλυνσης από BKPyV στα αποθέματά τους, προκειμένου να διασφαλίσουν την αναπαραγωγιμότητα των πειραμάτων και την αξιοπιστία των δεδομένων.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης