SVG p12

A SVG p12 é uma linhagem de células gliais fetais humanas, originalmente derivada de tecido cerebral fetal e imortalizada por meio da transformação com o antígeno T grande do SV40. Ela tem sido amplamente utilizada como modelo para o estudo de poliomavírus neurotrópicos, particularmente o poliomavírus JC (JCPyV), devido à sua origem glial e à alta permissividade para infecção viral. A SVG p12 mantém características da linhagem astrocítica e permite a infecção produtiva e a propagação do JCPyV, tornando-se um sistema in vitro padrão para o estudo do tropismo viral, da replicação e da patogênese em células gliais.

No entanto, análises posteriores revelaram que a SVG p12 foi contaminada com o poliomavírus BK (BKPyV) após ter sido depositada em bancos de células. A detecção de DNA do BKPyV e de vírus infeccioso em linhagens de SVG p12 adquiridas de algumas coleções de culturas levantou preocupações quanto à integridade dos dados experimentais derivados dessas células. A contaminação não se estende a todas as linhagens derivadas da SVG, já que clones como o SVG-A apresentaram resultados negativos para o BKPyV, sugerindo que a contaminação ocorreu durante o manuseio ou a distribuição, e não durante a derivação original da linhagem celular.

Devido ao seu uso consolidado e à sua forte resposta à infecção por poliomavírus, a SVG p12 continua sendo uma ferramenta fundamental na pesquisa virológica, particularmente no contexto da neurovirologia humana. No entanto, recomenda-se agora que os pesquisadores que utilizam essa linhagem celular verifiquem a ausência de contaminação pelo BKPyV em seus estoques, a fim de garantir a reprodutibilidade experimental e a confiabilidade dos dados.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.