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T84
Cell line · Product number 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- Esta línea celular presenta uniones estrechas y desmosomas entre las células adyacentes. Las células deben mantenerse a alta densidad (al menos 1/4 de confluencia).
- Tissue
- Dos puntos
- Disease
- Carcinoma
- Metastatic site
- Pulmón
- Applications
- Investigación sobre el cáncer colorrectal; biología del epitelio intestinal; estudios sobre las uniones estrechas y la función de barrera; fisiología del transporte colónico; investigación sobre el regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR); absorción y metabolismo de fármacos; modelos de xenoinjertos
- Synonyms
- T-84
- T 84
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Cell type
- Células epiteliales
- Tumourigenic
- Sí, en ratones desnudos
- Karyotype
- El número modal de cromosomas de la línea madre es de 56, con una frecuencia del 28 %, mientras que la poliploidía se presenta en el 12,4 %. Dieciocho marcadores son comunes a la mayoría de las metafases examinadas. El cromosoma X normal y el cromosoma 13 estaban ausentes; los cromosomas 2, 4 y 22 presentaban una sola copia, y el cromosoma 12 presentaba cuatro copias. No se detectó ningún cromosoma Y mediante observación de bandas Q. Se observó DM en casi el 50 % de las células.
- Doubling time
- aprox. de 48 a 72 horas
04Identifiers
- Citation
- T84 (número de catálogo de Cytion 300354)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Hormona peptídica, neurotransmisor
- Antigen expression
- Queratina + (tinción con inmunoperoxidasa)
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Mutational profile
- Las células T84 presentan una mutación heterocigótica en el codón 13 del gen Kras: GGC (Gly, tipo salvaje) > GAC (Asp)
- Products
- Antígeno carcinoembrionario (CEA), 600 ng/ml por cada 10 exp6 células cada 10 días, queratina
06Handling and culture
- Culture medium
- F12 de Ham, con: 1,0 mM de glutamina estable, con: 1,0 mM de piruvato de sodio, con: 1,1 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820600a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Split ratio
- 1 a 3
- Seeding density
- De 1 a 2 × 10⁴ células/cm² (mantener una confluencia mínima de 1/4 para preservar el fenotipo de las uniones estrechas)
- Fluid renewal
- 2 veces por semana
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se adhieran durante al menos 24–48 horas. Mantenga las células a alta densidad (≥25 % de confluencia) para preservar la formación de uniones estrechas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 72 años
- Ethnicity
- Origen étnico no especificado
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes