Премини към съдържанието
T84
Тъкан
Дебело черво
Заболяване
Карцином
Място на метастазите
Бял дроб
Синоними
T-84, T 84

Документи

T84

Cell line · Номер на продукта 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание
В тази линия се наблюдават плътни връзки и дезмозоми между съседните клетки. Клетките трябва да се поддържат с висока плътност (поне 1/4 срастване).
Тъкан
Дебело черво
Заболяване
Карцином
Място на метастазите
Бял дроб
Приложения
Изследвания в областта на колоректалния рак; биология на чревния епител; изследвания на плътните съединения и бариерната функция; физиология на транспорта в дебелото черво; изследвания на регулатора на трансмембранната проводимост при кистозна фиброза (CFTR); абсорбция и метаболизъм на лекарства; модели с ксенографти
Синоними
  • T-84
  • T 84

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Туморогенен
Да, при голи мишки
Кариотип
Модалният брой хромозоми в стъблото е 56, като те се срещат в 28%, а полиплоидността е 12,4%. Осемнадесет маркера са общи за повечето изследвани метафази. Липсват нормален х и хромозома 13, хромозоми 2, 4 и 22 са единично копирани, а хромозома 12 е 4-копирана. не е открита Y хромозома чрез наблюдение на Q лента. DM се среща в почти 50 % от клетките.
Време за удвояване
приблизително от 48 до 72 часа

04Идентификатори

Източник
T84 (каталожен номер 300354 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0555

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Пептиден хормон, невротрансмитер
Експресия на антигена
Кератин + (имунопероксидазно оцветяване)
Изоензими
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Мутационен профил
Клетките T84 носят хетерозиготна мутация на Kras в кодон 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Продукти
Карциноембрионален антиген (CEA), 600 ng/ml на 10 експ6 клетки за 10 дни, кератин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
Ham's F12, w: 1,0 mM стабилен глутамин, w: 1,0 mM натриев пируват, w: 1,1 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820600a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
1 до 2 × 10⁴ клетки/cm² (поддържайте конфуентност от най-малко 1/4, за да се запази фенотипът на плътните съединения)
Обновяване на течността
2 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване разпределете клетките в култура с плътност 5 × 10⁴ клетки/см² и изчакайте поне 24–48 часа, докато се прикрепят. Поддържайте клетките при висока плътност (≥25% конфлуентност), за да се запази образуването на плътни съединения.
Размразяване и култивиране

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
72 години
Етническа принадлежност
Етническа принадлежност – неуточнена