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T84
Cell line · Codice prodotto 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Personalizzazione / Suggerimenti
- T84Cell line€430.00
Consigliati (partita più recente)
01Informazioni generali
- Descrizione
- Questa linea presenta giunzioni strette e desmosomi tra le cellule adiacenti. Le cellule devono essere mantenute ad alta densità (almeno 1/4 di confluenza).
- Tessuto
- Colon
- Malattia
- Carcinoma
- Sito metastatico
- Polmone
- Applicazioni
- Ricerca sul cancro del colon-retto; biologia dell'epitelio intestinale; studi sulle giunzioni strette e sulla funzione di barriera; fisiologia del trasporto nel colon; ricerca sul regolatore della conduttanza transmembrana nella fibrosi cistica (CFTR); assorbimento e metabolismo dei farmaci; modelli di xenotrapianto
- Sinonimi
- T-84
- T 84
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Presenza di OGM
- Senza OGM
- Dettagli sullo stato degli OGM
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tipo di cellula
- Cellule epiteliali
- Tumorigenico
- Sì, in topi nudi
- Cariotipo
- Il numero modale di cromosomi della linea staminale è 56, presente nel 28% dei casi, con una poliploidia del 12,4%. Diciotto marcatori sono comuni alla maggior parte delle metafasi esaminate. Il cromosoma x normale e il cromosoma 13 erano assenti, i cromosomi 2, 4 e 22 erano monocopiati e il cromosoma 12 era quadruplo. Nessun cromosoma Y è stato rilevato dall'osservazione della banda Q. La DM si è verificata in quasi il 50% delle cellule.
- Tempo di raddoppio
- da circa 48 a 72 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- T84 (numero di catalogo Cytion 300354)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Espressione e suscettibilità
- Recettori espressi
- Ormone peptidico, neurotrasmettitore
- Espressione dell'antigene
- Cheratina + (colorazione con immunoperossidasi)
- Isoenzimi
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Profilo mutazionale
- Le cellule T84 portano una mutazione Kras eterozigote nel codone 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Prodotti
- Antigene carcinoembrionico (CEA), 600 ng/ml per 10 cellule exp6 per 10 giorni, cheratina
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- Ham's F12, w: 1,0 mM di glutammina stabile, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 1,1 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820600a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Rapporto di frazionamento
- da 1 a 3
- Densità di semina
- Da 1 a 2 × 10⁴ cellule/cm² (mantenere una confluenza di almeno 1/4 per preservare il fenotipo delle giunzioni strette)
- Rinnovo dei fluidi
- 2 volte a settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, seminare le cellule a una densità di 5 × 10⁴ cellule/cm² e lasciare che aderiscano per almeno 24–48 ore. Mantenere le cellule ad alta densità (≥25% di confluenza) per preservare la formazione delle giunzioni strette.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Età dei donatori
- 72 anni
- Etnia
- Etnia non specificata
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì