Pereiti prie turinio
T84
Audinys
Storosios žarnos
Liga
Karcinoma
Metastazių vieta
Plaučiai
Sinonimai
T-84, T 84

Dokumentai

T84

Cell line · Prekės numeris 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas
Šioje linijoje tarp gretimų ląstelių yra glaudžių jungčių ir desmosomų. Ląstelių tankis turi būti didelis (ne mažesnis kaip 1/4 susiliejimo).
Audinys
Storosios žarnos
Liga
Karcinoma
Metastazių vieta
Plaučiai
Paraiškos
Kolorektalinio vėžio tyrimai; žarnyno epitelio biologija; sandariųjų jungčių ir barjerinės funkcijos tyrimai; storosios žarnos transporto fiziologija; cistinės fibrozės transmembraninio laidumo reguliatoriaus (CFTR) tyrimai; vaistų absorbcija ir metabolizmas; ksenotransplantacijos modeliai
Sinonimai
  • T-84
  • T 84

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis
Kariotipas
Stiebų linijos modalinis chromosomų skaičius yra 56, jų pasitaiko 28 %, o poliploidijos - 12,4 %. Aštuoniolika žymenų būdingi daugumai tirtų metafazių. Normalaus x ir 13 chromosomos nebuvo, 2, 4 ir 22 chromosomos buvo viengubos, o 12 chromosoma - keturguba. stebint Q juostą, Y chromosomos neaptikta. DM pasireiškė beveik 50 % ląstelių.
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug nuo 48 iki 72 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
T84 (Cytion katalogo numeris 300354)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0555

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
Peptidinis hormonas, neurotransmiteris
Antigeno ekspresija
Keratinas + (imunoperoksidazės dažymas)
Izofermentai
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Mutacijų profilis
T84 ląstelės turi heterozigotinę Kras mutaciją 13 kodone: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Produktai
Karcinoembrioninis antigenas (CEA), 600 ng/ml 10 eksp6 ląstelių per 10 dienų, keratinas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilus glutaminas, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820600a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
1–2 × 10⁴ ląstelių/cm² (išlaikyti ne mažiau kaip 1/4 konfluencijos, kad būtų išsaugotas glaudžių jungčių fenotipas)
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius ląsteles, jas išsėkite į lėkšteles, kad tankis būtų 5 × 10⁴ ląstelių/cm², ir palikite prisitvirtinti mažiausiai 24–48 valandas. Ląsteles laikykite dideliu tankiu (≥25 % konfluencijos), kad būtų išlaikytas glaudžių jungčių susidarymas.
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
72 metai
Etninė priklausomybė
Tautybė nenurodyta