Skip to content
T84
Tissue
קולון
Disease
קרצינומה
Metastatic site
ריאה
Synonyms
T-84, T 84

Documents

T84

Cell line · Product number 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
קו זה מציג חיבורים הדוקים ודיסמוזומים בין תאים סמוכים. יש לשמור על צפיפות גבוהה של התאים (לפחות 1/4 צפיפות).
Tissue
קולון
Disease
קרצינומה
Metastatic site
ריאה
Applications
מחקר בנושא סרטן המעי הגס; ביולוגיה של אפיתל המעי; מחקרים על חיבורים הדוקים ותפקוד המחסום; פיזיולוגיה של ההובלה במעי הגס; מחקר בנושא הרגולטור של המוליכות הטרנסממברנית בסיסטיק פיברוזיס (CFTR); ספיגת תרופות ומטבוליזם; מודלים של שתלים בין-מיניים
Synonyms
  • T-84
  • T 84

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים
Karyotype
מספר הכרומוזומים המודאלי של קו הגזע הוא 56, המופיע ב-28% עם פוליפלואידיות של 12.4%. 18 סמנים משותפים לרוב המטאפזות שנבדקו. כרומוזום X וכרומוזום 13 נורמליים לא נמצאו, כרומוזומים 2, 4 ו-22 היו בעותק אחד, וכרומוזום 12 היה ב-4 עותקים. לא זוהה כרומוזום Y בתצפית Q band. DM הופיע בכמעט 50% מהתאים.
Doubling time
כ-48 עד 72 שעות

04Identifiers

Citation
T84 (מספר קטלוגי Cytion 300354)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0555

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
הורמון פפטיד, נוירוטרנסמיטור
Antigen expression
קרטין + (צביעת אימונופרוקסידאז)
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Mutational profile
תאי T84 נושאים מוטציה Kras הטרוזיגוטית בקודון 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Products
אנטיגן קרצינואמבריוני (CEA), 600 נ"ג/מ"ל לכל 10 exp6 תאים לכל 10 ימים, קרטין

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
1 עד 2 × 10⁴ תאים/סמ"ר (יש לשמור על צפיפות של לפחות 1/4 כדי לשמר את הפנוטיפ של המרווחים הצמודים)
Fluid renewal
פעמיים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, יש להניח את התאים בצפיפות של 5 × 10⁴ תאים/סמ"ר ולהמתין לפחות 24–48 שעות עד להיצמדותם. יש לשמור על צפיפות גבוהה של התאים (≥25% כיסוי) כדי לשמור על היווצרות חיבורים הדוקים.
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
72 שנים
Ethnicity
מוצא אתני לא צוין