İçeriğe atla
T84
Doku
Kolon
Hastalık
Karsinom
Metastaz yeri
Akciğer
Eş anlamlılar
T-84, T 84

Belgeler

T84

Cell line · Ürün numarası 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Bu çizgi, bitişik hücreler arasında sıkı bağlantılar ve desmozomlar sergiler. Hücreler yüksek yoğunlukta tutulmalıdır (en az 1/4 konfluens).
Doku
Kolon
Hastalık
Karsinom
Metastaz yeri
Akciğer
Uygulamalar
Kolorektal kanser araştırmaları; bağırsak epitel biyolojisi; sıkı bağlantı ve bariyer fonksiyonu çalışmaları; kolon transport fizyolojisi; kistik fibroz transmembran iletkenlik düzenleyicisi (CFTR) araştırmaları; ilaç emilimi ve metabolizması; ksenogreft modelleri
Eş anlamlılar
  • T-84
  • T 84

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GDO'suz
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde
Karyotip
Kök hattı modal kromozom sayısı 56'dır ve %12,4 oranında poliploidi ile %28 oranında görülür. İncelenen metafazların çoğunda on sekiz belirteç ortaktır. Normal x ve kromozom 13 yoktu, kromozom 2, 4 ve 22 tek kopyalıydı ve kromozom 12 4 kopyalıydı.Q bant gözlemi ile Y kromozomu tespit edilmedi. Hücrelerin yaklaşık %50'sinde DM meydana gelmiştir.
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 48 ila 72 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
T84 (Cytion katalog numarası 300354)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0555

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Peptit hormon, nörotransmitter
Antijen ekspresyonu
Keratin + (İmmünoperoksidaz boyama)
İzoenzimler
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Mutasyon profili
T84 hücreleri kodon13'te heterozigot Kras mutasyonu taşır: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Ürünler
Karsinoembriyonik antijen (CEA), 10 günde 10 eksp6 hücre başına 600 ng/ml, keratin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Ham's F12, w: 1.0 mM stabil Glutamin, w: 1.0 mM Sodyum piruvat, w: 1.1 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820600a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
1 ila 2 × 10⁴ hücre/cm² (sıkı bağlantı fenotipini korumak için en az 1/4 konfluans seviyesini koruyun)
Sıvı değişimi
haftada 2 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 × 10⁴ hücre/cm² yoğunluğunda plakalara ekleyin ve yapışmaları için en az 24–48 saat bekleyin. Sıkı bağlantı oluşumunu korumak için hücreleri yüksek yoğunlukta (≥%25 konfluans) tutun.
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
72 yıl
Etnik köken
Etnik köken belirtilmemiş