Langsung ke isi
T84
Tisu
Usus besar
Penyakit
Karsinoma
Lokasi metastasis
Paru-paru
Sinonim
T-84, T 84

Dokumen

T84

Cell line · Nomor produk 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi
Garis ini menunjukkan persimpangan yang rapat, dan desmosom di antara sel-sel yang berdekatan. Sel-sel harus dipertahankan pada kepadatan tinggi (setidaknya 1/4 pertemuan).
Tisu
Usus besar
Penyakit
Karsinoma
Lokasi metastasis
Paru-paru
Aplikasi
Penelitian kanker kolorektal; biologi epitel usus; studi tentang sambungan rapat dan fungsi penghalang; fisiologi transportasi usus besar; penelitian tentang regulator konduktansi transmembran fibrosis kistik (CFTR); penyerapan dan metabolisme obat; model xenograft
Sinonim
  • T-84
  • T 84

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
Bebas Transgenik
Rincian status GMO
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Sel epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang
Kariotipe
Jumlah kromosom modal stemline adalah 56, terjadi pada 28% dengan poliploidi 12,4%. Delapan belas penanda umum ditemukan pada sebagian besar metafase yang diperiksa. Kromosom X dan kromosom 13 yang normal tidak ada, kromosom 2, 4 dan 22 disalin tunggal, dan kromosom 12 disalin 4. Tidak ada kromosom Y yang terdeteksi oleh pengamatan pita Q. DM terjadi pada hampir 50% sel.
Waktu penggandaan
sekitar 48 hingga 72 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
T84 (Nomor katalog Cytion 300354)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0555

05Ekspresi dan kerentanan

Reseptor yang diekspresikan
Hormon peptida, neurotransmitter
Ekspresi antigen
Keratin + (Pewarnaan imunoperoksidase)
Isoenzim
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Profil mutasi
Sel T84 membawa mutasi Kras heterozigot pada kodon13: GGC (Wt Gly)>GAC (Asp)
Produk
Carcinoembryonic antigen (CEA), 600 ng/ml per 10 sel exp6 per 10 hari, keratin

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
Ham's F12, w: 1,0 mM Glutamin stabil, w: 1,0 mM Natrium piruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820600a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Rasio pemisahan
1 sampai 3
Kepadatan penanaman
1 hingga 2 × 10⁴ sel/cm² (pertahankan kepadatan sel minimal 1/4 agar fenotipe sambungan rapat tetap terjaga)
Pergantian cairan
2 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 × 10⁴ sel/cm² dan biarkan selama minimal 24–48 jam agar sel menempel. Pertahankan sel pada kepadatan tinggi (≥25% konfluensi) untuk menjaga pembentukan sambungan rapat.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
72 tahun
Etnis
Suku tidak disebutkan