.jpg)
T84
Cell line · Številka izdelka 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Prilagajanje / Priporočila
- T84Cell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
- V tej liniji so med sosednjimi celicami vidni tesni stiki in desmosomi. Celice je treba vzdrževati pri visoki gostoti (vsaj 1/4 konfluence).
- Tkivo
- Debelo črevo
- Bolezen
- Karcinom
- Mesto metastaze
- Pljuča
- Uporaba
- Raziskave raka debelega črevesa in danke; biologija črevesnega epitelija; študije tesnih spojev in pregradne funkcije; fiziologija transporta v debelem črevesu; raziskave regulatorja transmembranske prevodnosti pri cistični fibrozi (CFTR); absorpcija in presnova zdravil; modeli ksenotransplantatov
- Sinonimi
- T-84
- T 84
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Status GSO
- Brez gensko spremenjenih organizmov
- Podrobnosti o statusu GSO
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijam podobni
- Vrsta celice
- Epitelijske celice
- Tumorigeničen
- Da, na golih miših
- Kariotip
- Modalno število kromosomov na steblu je 56, pojavlja se v 28 %, poliploidije pa je 12,4 %. Osemnajst označevalcev je skupnih večini pregledanih metafaz. Normalni x in kromosom 13 nista bila prisotna, kromosomi 2, 4 in 22 so bili enokopični, kromosom 12 pa štirikopičen. z opazovanjem traku Q ni bilo mogoče odkriti kromosoma Y. DM se je pojavil v skoraj 50 % celic.
- Čas podvojitve
- približno 48 do 72 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- T84 (kataloška številka Cytion 300354)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Izražanje in dovzetnost
- Izraženi receptorji
- Peptidni hormon, nevrotransmiter
- Ekspresija antigena
- Keratin + (barvanje z imunoperoksidazo)
- Izoenzimi
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Profil mutacij
- Celice T84 imajo heterozigotno mutacijo Krasa v kodonu 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Izdelki
- Karcinoembrionalni antigen (CEA), 600 ng/ml na 10 eksp6 celic na 10 dni, keratin
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnega glutamina, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 1,1 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820600a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Razmerje delitve
- 1 do 3
- Gostota setve
- 1 do 2 × 10⁴ celic/cm² (ohranjajte vsaj 1/4 konfluence, da se ohrani fenotip tesnih spojev)
- Obnova tekočine
- 2-krat na teden
- Obnova po odtaljevanju
- Po odmrznitvi celice posadite v gostoti 5 × 10⁴ celic/cm² in jim pustite vsaj 24–48 ur časa za prirast. Celice vzdržujte v visoki gostoti (≥25 % konfluence), da se ohrani nastajanje tesnih spojev.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- 72 let
- Etnična pripadnost
- Etnična pripadnost ni navedena
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da