.jpg)
T84
Cell line · Varenummer 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Tilpasning / Anbefalinger
- T84Cell line€430.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
- Denne linje udviser tight junctions og desmosomer mellem tilstødende celler. Cellerne skal holdes ved høj tæthed (mindst 1/4 konfluency).
- Væv
- Tarm
- Sygdom
- Karcinom
- Metastasested
- Lunge
- Anvendelser
- Forskning i kolorektal kræft; tarmepitelbiologi; undersøgelser af tætte samlinger og barrierefunktion; transportfysiologi i tyktarmen; forskning i cystisk fibrose-transmembranledningsregulatoren (CFTR); lægemiddelabsorption og -metabolisme; xenotransplantationsmodeller
- Synonymer
- T-84
- T 84
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Mand
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-fri
- Oplysninger om GMO-status
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitheliale celler
- Tumorfremkaldende
- Yeees, i nøgne mus
- Karyotype
- Stamlinjens modale kromosomtal er 56 og forekommer i 28 % af tilfældene med polyploidi i 12,4 % af tilfældene. Atten markører er fælles for de fleste undersøgte metafaser. Normal x og kromosom 13 var fraværende, kromosom 2, 4 og 22 var enkeltkopierede, og kromosom 12 var 4-kopieret. Der blev ikke fundet noget Y-kromosom ved Q-bånd-observation. DM forekom i næsten 50 % af cellerne.
- Fordoblingstid
- ca. 48 til 72 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- T84 (Cytion katalognummer 300354)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Udtryk og modtagelighed
- Udtrykte receptorer
- Peptidhormon, neurotransmitter
- Antigenudtryk
- Keratin + (immunoperoxidase-farvning)
- Isoenzymer
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Mutationsprofil
- T84-celler bærer en heterozygot Kras-mutation i codon13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Produkter
- Carcinoembryonalt antigen (CEA), 600 ng/ml pr. 10 exp6 celler pr. 10 dage, keratin
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Opdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtæthed
- 1 til 2 × 10⁴ celler/cm² (oprethold en konfluens på mindst 1/4 for at bevare fænotypen for tætte samlinger)
- Væskeudskiftning
- 2 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning udplades cellerne med en tæthed på 5 × 10⁴ celler/cm², og der afventes mindst 24–48 timer, indtil de har sat sig fast. Cellerne holdes ved høj tæthed (≥25 % konfluens) for at bevare dannelsen af tætte forbindelser.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- 72 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Etnisk tilhørsforhold ikke angivet
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja