.jpg)
T84
Cell line · Produktnummer 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Anpassning / Rekommendationer
- T84Cell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
- Denna linje uppvisar tight junctions och desmosomer mellan intilliggande celler. Cellerna bör hållas vid hög densitet (minst 1/4 konfluency).
- Vävnad
- Kolon
- Sjukdom
- Carcinom
- Metastaseringsställe
- Lungan
- Ansökningar
- Forskning om kolorektal cancer; tarmepitelbiologi; studier av täta förbindelser och barriärfunktion; transportfysiologi i tjocktarmen; forskning om cystisk fibros-transmembranledningsregulatorn (CFTR); läkemedelsabsorption och metabolism; xenotransplantationsmodeller
- Synonymer
- T-84
- T 84
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- Utan genetiskt modifierade organismer
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Celltyp
- Epiteliala celler
- Tumörframkallande
- Ja, i nakna möss
- Karyotyp
- Stamlinjens modala kromosomantal är 56, vilket förekommer hos 28% med polyploidi hos 12,4%. Arton markörer är gemensamma för de flesta undersökta metafaserna. Normal x och kromosom 13 saknades, kromosomerna 2, 4 och 22 var enkelkopierade och kromosom 12 var 4-kopierad. Ingen Y-kromosom upptäcktes genom Q-bandsobservation. DM förekom i nästan 50% av cellerna.
- Fördubblingstid
- ca 48 till 72 timmar
04Identifierare
- Källa
- T84 (Cytion katalognummer 300354)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Uttryck och mottaglighet
- Receptorer som uttrycks
- Peptidhormon, neurotransmittor
- Antigenuttryck
- Keratin + (immunoperoxidasfärgning)
- Isoenzymer
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Mutationsprofil
- T84-celler bär på en heterozygot Kras-mutation i kodon13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Produkter
- Carcinoembryonalt antigen (CEA), 600 ng/ml per 10 exp6 celler per 10 dagar, keratin
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabilt glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Uppdelningsförhållande
- 1 till 3
- Såtäthet
- 1 till 2 × 10⁴ celler/cm² (håll en konfluens på minst 1/4 för att bevara fenotypen för täta förbindelser)
- Vätskeförnyelse
- 2 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
- Efter upptining ska cellerna odlas ut med en täthet på 5 × 10⁴ celler/cm² och få minst 24–48 timmar på sig att fästa. Håll cellerna vid hög täthet (≥25 % konfluens) för att upprätthålla bildandet av täta förbindelser.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- 72 år
- Etnicitet
- Etnicitet ej angiven
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja