T84
Cell line · Numer produktu 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Dostosowanie / Zalecenia
- T84Cell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
- Linia ta wykazuje ścisłe połączenia i desmosomy między sąsiednimi komórkami. Komórki powinny być utrzymywane w wysokiej gęstości (co najmniej 1/4 konfluencji).
- Chusteczka
- Colon
- Choroba
- Rak
- Miejsce przerzutów
- Płuco
- Zastosowania
- Badania nad rakiem jelita grubego; biologia nabłonka jelitowego; badania nad połączeniami ścisłymi i funkcją barierową; fizjologia transportu w okrężnicy; badania nad regulatorem przewodnictwa transbłonowego w mukowiscydozie (CFTR); wchłanianie i metabolizm leków; modele przeszczepów heterogenicznych
- Synonimy
- T-84
- T 84
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Status GMO
- Bez GMO
- Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Typ komórki
- Komórki nabłonkowe
- Nowotworotwórczy
- Tak, u nagich myszy
- Karyotyp
- Modalna liczba chromosomów linii macierzystej wynosi 56, występując w 28% z poliploidią na poziomie 12,4%. Osiemnaście markerów jest wspólnych dla większości badanych metafaz. Normalny chromosom x i chromosom 13 były nieobecne, chromosomy 2, 4 i 22 były jednokopijne, a chromosom 12 był czterokopijny. Żaden chromosom Y nie został wykryty przez obserwację pasma Q. DM występował w prawie 50% komórek.
- Czas podwojenia
- ok. 48–72 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- T84 (numer katalogowy Cytion 300354)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Ekspresja i podatność
- Receptory ulegające ekspresji
- Hormon peptydowy, neuroprzekaźnik
- Ekspresja antygenu
- Keratyna + (barwienie immunoperoksydazą)
- Izoenzymy
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Profil mutacji
- Komórki T84 są nosicielami heterozygotycznej mutacji Kras w kodonie 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Produkty
- Antygen rakowo-płodowy (CEA), 600 ng/ml na 10 komórek exp6 na 10 dni, keratyna
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnej glutaminy, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 1,1 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820600a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Współczynnik podziału
- od 1 do 3
- Gęstość wysiewu
- 1 do 2 × 10⁴ komórek/cm² (należy utrzymywać co najmniej 1/4 stopnia konfluencji, aby zachować fenotyp połączeń ścisłych)
- Odnawianie płynów
- 2 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Po rozmrożeniu należy wysiać komórki w gęstości 5 × 10⁴ komórek/cm² i pozostawić je na co najmniej 24–48 godzin w celu przylegania. Należy utrzymywać komórki w wysokiej gęstości (konfluencja ≥25%), aby zapewnić tworzenie się ścisłych połączeń.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 72 lata
- Pochodzenie etniczne
- Pochodzenie etniczne nieokreślone
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
.jpg)