.jpg)
T84
Cell line · Preces numurs 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Pielāgošana / Ieteikumi
- T84Cell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
- Šajā līnijā starp blakus esošajām šūnām ir izveidojušies cieši savienojumi un desmosomas. Šūnas jāuztur lielā blīvumā (vismaz 1/4 konfluences).
- Audums
- Resnās zarnas
- Slimība
- Karcinoma
- Metastāžu vieta
- Plaušas
- Pieteikumi
- Kolorektālā vēža pētījumi; zarnu epitēlija bioloģija; pētījumi par ciešajiem savienojumiem un barjeras funkciju; resnās zarnas transporta fizioloģija; cistiskās fibrozes transmembrānas vadītspējas regulatora (CFTR) pētījumi; zāļu uzsūkšanās un metabolisms; ksenotransplantātu modeļi
- Sinonīmi
- T-84
- T 84
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- ĢMO statuss
- Bez ĢMO
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Šūnu tips
- Epitēlija šūnas
- Tumorogēns
- Jā, kailām pelēm
- Kariotips
- Cilmes līnijas modālais hromosomu skaits ir 56, sastopams 28 %, bet poliploīdijas īpatsvars ir 12,4 %. Astoņpadsmit marķieri ir kopīgi lielākajai daļai pārbaudīto metafāžu. Normālā x un 13. hromosoma nebija sastopamas, 2., 4. un 22. hromosoma bija vienkopējas, bet 12. hromosoma bija četrkopēja.Q joslas novērojumā Y hromosoma netika konstatēta. DM sastopams gandrīz 50 % šūnu.
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- aptuveni 48 līdz 72 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- T84 (Cytion kataloga numurs 300354)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Pazīmes un uzņēmība
- Ekspresētie receptori
- Peptidu hormons, neirotransmiters
- Antigēna ekspresija
- Keratīns + (imūnperoksidāzes krāsojums)
- Izoenzīmi
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Mutāciju profils
- T84 šūnās ir heterozigotiska Kras mutācija kodonā 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Produkti
- Karcinoembrionālais antigēns (CEA), 600 ng/ml uz 10 eksp6 šūnām 10 dienas, keratīns
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sadalījuma attiecība
- no 1 līdz 3
- Sēšanas blīvums
- 1 līdz 2 × 10⁴ šūnas/cm² (jāuztur vismaz 1/4 konfluences pakāpe, lai saglabātu ciešo savienojumu fenotipu)
- Šķidruma atjaunošana
- 2 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izsējiet šūnas ar blīvumu 5 × 10⁴ šūnas/cm² un ļaujiet tām piestiprināties vismaz 24–48 stundas. Uzturiet šūnas augstā blīvumā (≥25 % konfluences pakāpe), lai saglabātu ciešo savienojumu veidošanos.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 72 gadi
- Etniskā piederība
- Etniskā piederība nav norādīta
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā