.jpg)
T84
Cell line · Termékszám 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Személyre szabás / Ajánlások
- T84Cell line€430.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
- Ez a vonal szoros kötéseket és deszmoszómákat mutat a szomszédos sejtek között. A sejteket nagy sűrűségben kell tartani (legalább 1/4 konfluencia).
- Szövet
- Vastagbél
- Betegség
- Karcinóma
- Áttétes hely
- Tüdő
- Alkalmazások
- Vastagbélrák-kutatás; bélhám-biológia; szoros illesztékek és gátfunkciók vizsgálata; vastagbél-transzport fiziológiája; cisztás fibrózis transzmembrán konduktancia-szabályozó (CFTR) kutatás; gyógyszerfelszívódás és -metabolizmus; xenotranszplantációs modellek
- Szinonimák
- T-84
- T 84
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Férfi
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-mentes
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű
- Sejttípus
- Epithel sejtek
- Daganatképző
- Igen, meztelen egerekben
- Kariotípus
- A törzshálózati modális kromoszómaszám 56, amely 28%-ban fordul elő, a poliploidia aránya 12,4%. Tizennyolc marker közös a legtöbb vizsgált metafázisban. A normális x és a 13. kromoszóma hiányzott, a 2., 4. és 22. kromoszóma egyszeresen, a 12. kromoszóma pedig négyszeresen kopírozott volt. Q-sávos megfigyeléssel Y-kromoszómát nem mutattak ki. DM a sejtek közel 50%-ában fordult elő.
- Kettőzési idő
- kb. 48–72 óra
04Azonosítók
- Hivatkozás
- T84 (Cytion katalógusszám: 300354)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Kifejeződés és fogékonyság
- Kifejeződő receptorok
- Peptid hormon, neurotranszmitter
- Antigén-expresszió
- Keratin + (immunoperoxidáz festés)
- Izoenzimek
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Mutációs profil
- A T84 sejtek heterozigóta Kras mutációt hordoznak a 13-as kodonban: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Termékek
- Karcinoembrionális antigén (CEA), 600 ng/ml per 10 exp6 sejt per 10 nap, keratin
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Osztási arány
- 1–3
- Ültetési sűrűség
- 1–2 × 10⁴ sejt/cm² (a szoros kapcsolódási fenotípus megőrzése érdekében a sejtek konfluenciáját legalább 1/4-es szinten kell tartani)
- Folyadékcsere
- hetente 2 alkalommal
- Az olvadás utáni helyreállás
- Felolvasztás után a sejteket 5 × 10⁴ sejt/cm² sűrűséggel ültessük be, és hagyjuk legalább 24–48 órán át tapadni. A szoros kapcsolódások kialakulásának fenntartása érdekében a sejteket magas sűrűségben (≥25% konfluencia) tartsuk.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- 72 év
- Etnikai hovatartozás
- Etnikai hovatartozás nem megadva
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen