Skip to content
T84
Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư biểu mô
Metastatic site
Phổi
Synonyms
T-84, T 84

Documents

T84

Cell line · Product number 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
Dòng tế bào này có các liên kết chặt chẽ và desmosomes giữa các tế bào liền kề. Các tế bào nên được duy trì ở mật độ cao (ít nhất 1/4 mật độ phủ kín).
Tissue
Đại tràng
Disease
Ung thư biểu mô
Metastatic site
Phổi
Applications
Nghiên cứu ung thư đại trực tràng; sinh học biểu mô ruột; các nghiên cứu về liên kết chặt chẽ và chức năng hàng rào; sinh lý học vận chuyển ở đại tràng; nghiên cứu về protein điều hòa dẫn truyền xuyên màng trong bệnh xơ nang (CFTR); sự hấp thu và chuyển hóa thuốc; các mô hình cấy ghép dị loài
Synonyms
  • T-84
  • T 84

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, ở chuột nude
Karyotype
Số lượng nhiễm sắc thể trung bình của dòng tế bào gốc là 56, chiếm 28%, với tỷ lệ đa bội là 12,4%. Mười tám dấu hiệu là chung cho hầu hết các giai đoạn metaphase được kiểm tra. Nhu cầu nhiễm sắc thể X và nhiễm sắc thể 13 bình thường, nhiễm sắc thể 2, 4 và 22 có một bản sao, và nhiễm sắc thể 12 có 4 bản sao. Không phát hiện nhiễm sắc thể Y bằng quan sát Q band. DM xảy ra ở gần 50% các tế bào.
Doubling time
khoảng 48 đến 72 giờ

04Identifiers

Citation
T84 (Số catalog Cytion 300354)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0555

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Peptide hormone, chất dẫn truyền thần kinh
Antigen expression
Keratin + (Nhuộm miễn dịch peroxidase)
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Mutational profile
Tế bào T84 mang đột biến Kras dị hợp tử tại codon 13: GGC (Glycin bình thường) > GAC (Aspirin)
Products
Kháng nguyên ung thư phôi (CEA), 600 ng/ml trên 10 tế bào exp6 mỗi 10 ngày, keratin

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, chứa: 1,0 mM glutamine ổn định, chứa: 1,0 mM natri pyruvate, chứa: 1,1 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 3
Seeding density
1 đến 2 × 10⁴ tế bào/cm² (duy trì mật độ phủ ít nhất 1/4 để bảo tồn kiểu hình của các mối nối chặt chẽ)
Fluid renewal
2 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 × 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào bám dính trong ít nhất 24–48 giờ. Duy trì tế bào ở mật độ cao (độ phủ ≥25%) để đảm bảo sự hình thành các liên kết chặt chẽ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
72 năm
Ethnicity
Không xác định dân tộc