Skip to content
T84
Tissue
ลำไส้ใหญ่
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Metastatic site
ปอด
Synonyms
T-84, T 84

Documents

T84

Cell line · Product number 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
แถวนี้แสดงการเชื่อมต่อที่แน่นหนา และเดสโมโซมระหว่างเซลล์ที่อยู่ติดกัน เซลล์ควรรักษาความหนาแน่นสูง (อย่างน้อย 1/4 ของความหนาแน่นเต็มที่)
Tissue
ลำไส้ใหญ่
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Metastatic site
ปอด
Applications
การวิจัยมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก; ชีววิทยาของเยื่อบุผิวลำไส้; การศึกษาการทำงานของรอยต่อแน่นและหน้าที่ของแนวกั้น; สรีรวิทยาการลำเลียงในลำไส้ใหญ่; การวิจัยตัวควบคุมการนำไฟฟ้าข้ามเยื่อหุ้มเซลล์ในโรคซิสติกไฟโบรซิส (CFTR); การดูดซึมและเมตาบอลิซึมของยา; แบบจำลองการปลูกถ่ายอวัยวะในสัตว์ทดลอง
Synonyms
  • T-84
  • T 84

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน
Karyotype
จำนวนโครโมโซมโมดอลของสเต็มไลน์คือ 56 เกิดขึ้นที่ 28% โดยมีพอลิพลอยดีที่ 12.4%เครื่องหมาย 18 รายการพบได้ทั่วไปในเมทาเฟสส่วนใหญ่ที่ตรวจสอบ พบว่าโครโมโซมปกติ x และโครโมโซมที่ 13 ไม่มีอยู่ โครโมโซมที่ 2, 4 และ 22 มีเพียงชุดเดียว และโครโมโซมที่ 12 มี 4 ชุด ไม่พบโครโมโซม Y โดยการสังเกต Q band การเกิด DM เกิดขึ้นในเกือบ 50% ของเซลล์
Doubling time
ประมาณ 48 ถึง 72 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
T84 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300354)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0555

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
เปปไทด์ฮอร์โมน, นิวโรทรานส์มิตเตอร์
Antigen expression
เคราติน + (การย้อมด้วยอิมมูโนเปอร์ออกซิเดส)
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Mutational profile
เซลล์ T84 มีการกลายพันธุ์ของ Kras แบบเฮเทอโรไซกัสในโคดอนที่ 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Products
แอนติเจนคาร์ซิโนเอ็มบริโอนิก (CEA), 600 นาโนกรัม/มิลลิลิตร ต่อ 10 เซลล์ exp6 ต่อ 10 วัน, เคราติน

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM สเตเบิลกลูตามีน, w: 1.0 mM โซเดียมไพรูเวต, w: 1.1 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
1 ถึง 2 × 10⁴ เซลล์/ซม.² (รักษาความหนาแน่นของเซลล์ให้อยู่ที่อย่างน้อย 1/4 ของความหนาแน่นเต็มที่เพื่อคงลักษณะของรอยต่อแน่น)
Fluid renewal
2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ลงจานที่ความหนาแน่น 5 × 10⁴ เซลล์/ซม.² และปล่อยให้เซลล์ยึดเกาะอย่างน้อย 24–48 ชั่วโมง รักษาความหนาแน่นของเซลล์ให้อยู่ในระดับสูง (≥25% ของความหนาแน่นเต็มที่) เพื่อคงการก่อตัวของรอยต่อแน่น (tight junction)
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
72 ปี
Ethnicity
เชื้อชาติไม่ระบุ