.jpg)
T84
Cell line · Produktnummer 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Tilpasning / Anbefalinger
- T84Cell line€430.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
- Denne linjen viser tette overganger og desmosomer mellom tilstøtende celler. Cellene bør holdes ved høy tetthet (minst 1/4 konfluens).
- Vev
- Colon
- Sykdom
- Karsinom
- Metastaseområde
- Lunge
- Søknader
- Forskning på tykktarmskreft; tarmepitelbiologi; studier av tette forbindelser og barrierefunksjon; transportfysiologi i tykktarmen; forskning på cystisk fibrose-transmembran-konduktansregulator (CFTR); legemiddelabsorpsjon og -metabolisme; xenotransplantasjonsmodeller
- Synonymer
- T-84
- T 84
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Mann
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- GMO-status
- Uten GMO
- Detaljer om GMO-status
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitelceller
- Tumorinduserende
- Ja, i nakne mus
- Karyotype
- Det modale kromosomantallet i stamlinjen er 56, og forekommer i 28 % av tilfellene, med polyploidi i 12,4 %. Atten markører er felles for de fleste metafasene som ble undersøkt. Normal x og kromosom 13 var fraværende, kromosom 2, 4 og 22 var enkeltkopiert, og kromosom 12 var 4-kopiert. DM forekom i nesten 50 % av cellene.
- Fordoblingstid
- ca. 48 til 72 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- T84 (Cytion-katalognummer 300354)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Uttrykk og mottakelighet
- Reseptorer som uttrykkes
- Peptidhormon, nevrotransmitter
- Antigenuttrykk
- Keratin + (immunoperoksidase-farging)
- Isoenzymer
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Mutasjonsprofil
- T84-celler bærer en heterozygot Kras-mutasjon i kodon13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Produkter
- Karsinoembryonalt antigen (CEA), 600 ng/ml per 10 eksp6 celler per 10 dager, keratin
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- Ham's F12, m: 1,0 mM stabil glutamin, m: 1,0 mM natriumpyruvat, m: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820600a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Oppdelingsforhold
- 1 til 3
- Såtetthet
- 1 til 2 × 10⁴ celler/cm² (oppretthold minst 1/4 konfluens for å bevare fenotypen til tette forbindelser)
- Væskefornyelse
- 2 ganger per uke
- Gjenoppretting etter tining
- Etter opptining skal cellene sås med en tetthet på 5 × 10⁴ celler/cm², og det må gis minst 24–48 timer for at cellene skal feste seg. Cellene skal holdes ved høy tetthet (≥25 % konfluens) for å opprettholde dannelsen av tette forbindelser.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- 72 år
- Etnisitet
- Etnisk tilhørighet ikke angitt
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja