T84
Cell line · Αριθμός προϊόντος 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Προσαρμογή / Προτάσεις
- T84Cell line€430.00
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
01Γενικές πληροφορίες
- Περιγραφή
- Η γραμμή αυτή παρουσιάζει στενές συνδέσεις και δεσμοσώματα μεταξύ των παρακείμενων κυττάρων. Τα κύτταρα πρέπει να διατηρούνται σε υψηλή πυκνότητα (τουλάχιστον 1/4 της συρροής).
- Ιστός
- Κόλον
- Ασθένεια
- Καρκίνωμα
- Θέση μετάστασης
- Πνεύμονας
- Εφαρμογές
- Έρευνα για τον καρκίνο του παχέος εντέρου· βιολογία του εντερικού επιθηλίου· μελέτες σχετικά με τις στενές συνδέσεις και τη λειτουργία του φραγμού· φυσιολογία της μεταφοράς στο κόλον· έρευνα σχετικά με τον ρυθμιστή διαμεμβρανικής αγωγιμότητας της κυστικής ίνωσης (CFTR)· απορρόφηση και μεταβολισμός φαρμάκων· μοντέλα ξενομοσχεύματος
- Συνώνυμα
- T-84
- T 84
02Ταξινόμηση
- Οργανισμός
- Άνθρωπος
- Σεξ
- Άνδρας
- Ιδιότητες ανάπτυξης
- Πιστός
- Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
- Χωρίς ΓΤΟ
- Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- 1
03Χαρακτηριστικά
- Μορφολογία
- Επιθηλιοειδής
- Τύπος κυττάρου
- Επιθηλιακά κύτταρα
- Ογκογόνος
- Ναι, σε γυμνά ποντίκια
- Καρυότυπος
- Ο μέσος αριθμός χρωμοσωμάτων της βλαστικής γραμμής είναι 56, ο οποίος εμφανίζεται σε ποσοστό 28% με πολυπλοειδία σε ποσοστό 12,4%. Δεκαοκτώ δείκτες είναι κοινοί στις περισσότερες μεταφάσεις που εξετάστηκαν. Το φυσιολογικό x και το χρωμόσωμα 13 απουσίαζαν, τα χρωμοσώματα 2, 4 και 22 ήταν μονοαντιγραφικά και το χρωμόσωμα 12 ήταν 4-αντιγραφικό, ενώ κανένα χρωμόσωμα Y δεν ανιχνεύθηκε με την παρατήρηση της ζώνης Q. Το DM εμφανίστηκε σχεδόν στο 50% των κυττάρων.
- Χρόνος διπλασιασμού
- περίπου 48 έως 72 ώρες
04Αναγνωριστικά
- Παραπομπή
- T84 (αριθμός καταλόγου Cytion 300354)
- Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
- 9606
- Κελλοσαύρος
- CVCL_0555
05Έκφραση και ευαισθησία
- Υποδοχείς που εκφράζονται
- Πεπτιδική ορμόνη, νευροδιαβιβαστής
- Έκφραση αντιγόνου
- Κερατίνη + (χρώση ανοσοϋπεροξειδάσης)
- Ισοένζυμα
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Προφίλ μεταλλάξεων
- Τα κύτταρα T84 φέρουν ετερόζυγη μετάλλαξη Kras στο κωδικόνιο13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Προϊόντα
- Καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο (CEA), 600 ng/ml ανά 10 exp6 κύτταρα ανά 10 ημέρες, κερατίνη
06Χειρισμός και καλλιέργεια
- Θρεπτικό μέσο
- Ham's F12, w: 1,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,1 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820600a)
- Ατμόσφαιρα επώασης
37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.
- Συμπληρώματα
- Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
- Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
- Accutase
- Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
- Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
- Αναλογία διαχωρισμού
- 1 έως 3
- Πυκνότητα σποράς
- 1 έως 2 × 10⁴ κύτταρα/cm² (διατηρήστε τουλάχιστον το 1/4 της πυκνότητας, ώστε να διατηρηθεί ο φαινότυπος των στενών συνδέσεων)
- Ανανέωση υγρών
- 2 φορές την εβδομάδα
- Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
- Μετά την απόψυξη, μεταφέρετε τα κύτταρα σε τρυβλία με πυκνότητα 5 × 10⁴ κύτταρα/cm² και αφήστε τα να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24–48 ώρες. Διατηρήστε τα κύτταρα σε υψηλή πυκνότητα (≥25% συγκέντρωση) για να εξασφαλίσετε τον σχηματισμό στενών συνδέσεων.
- Απόψυξη και καλλιέργεια
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση
- Στειρότητα
Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.
Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.
- Μέσο κατάψυξης
- Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
- Συνθήκες αποθήκευσης
Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.
- Όροι αποστολής
Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.
08Δωρητής
- Ηλικία δωρητή
- 72 χρόνια
- Εθνικότητα
- Εθνικότητα μη προσδιορισμένη
09Νομικά θέματα και ασφάλεια
- Μέτρα ασφαλείας
- Όταν σχεδιάζετε να αποθηκεύσετε ένα κρυοφιαλίδιο σε υγρό άζωτο για μελλοντική απόψυξη, είναι υποχρεωτικό να τηρείτε αυστηρά μέτρα ασφαλείας. Τα κατάλληλα προστατευτικά γάντια και ο κατάλληλος προστατευτικός ρουχισμός είναι απαραίτητα, ενώ απαιτείται η χρήση μάσκας προσώπου ή γυαλιών ασφαλείας κατά τη μεταφορά κατεψυγμένων δειγμάτων προς ή από τη δεξαμενή υγρού αζώτου. Αυτό γίνεται για να μετριαστεί ο κίνδυνος τραυματισμού από πιθανές εκρήξεις κρυοσωλήνων κατά την απομάκρυνση, οι οποίες μπορεί να οδηγήσουν στην προβολή αιχμηρών θραυσμάτων.
- Εγγύηση
Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος
Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης
- Απαιτείται συμφωνία μεταφοράς υλικού
- Ναι
.jpg)