Μετάβαση στο περιεχόμενο
T84
Ιστός
Κόλον
Ασθένεια
Καρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Πνεύμονας
Συνώνυμα
T-84, T 84

Έγγραφα

T84

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Η γραμμή αυτή παρουσιάζει στενές συνδέσεις και δεσμοσώματα μεταξύ των παρακείμενων κυττάρων. Τα κύτταρα πρέπει να διατηρούνται σε υψηλή πυκνότητα (τουλάχιστον 1/4 της συρροής).
Ιστός
Κόλον
Ασθένεια
Καρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Πνεύμονας
Εφαρμογές
Έρευνα για τον καρκίνο του παχέος εντέρου· βιολογία του εντερικού επιθηλίου· μελέτες σχετικά με τις στενές συνδέσεις και τη λειτουργία του φραγμού· φυσιολογία της μεταφοράς στο κόλον· έρευνα σχετικά με τον ρυθμιστή διαμεμβρανικής αγωγιμότητας της κυστικής ίνωσης (CFTR)· απορρόφηση και μεταβολισμός φαρμάκων· μοντέλα ξενομοσχεύματος
Συνώνυμα
  • T-84
  • T 84

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
Χωρίς ΓΤΟ
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Τύπος κυττάρου
Επιθηλιακά κύτταρα
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια
Καρυότυπος
Ο μέσος αριθμός χρωμοσωμάτων της βλαστικής γραμμής είναι 56, ο οποίος εμφανίζεται σε ποσοστό 28% με πολυπλοειδία σε ποσοστό 12,4%. Δεκαοκτώ δείκτες είναι κοινοί στις περισσότερες μεταφάσεις που εξετάστηκαν. Το φυσιολογικό x και το χρωμόσωμα 13 απουσίαζαν, τα χρωμοσώματα 2, 4 και 22 ήταν μονοαντιγραφικά και το χρωμόσωμα 12 ήταν 4-αντιγραφικό, ενώ κανένα χρωμόσωμα Y δεν ανιχνεύθηκε με την παρατήρηση της ζώνης Q. Το DM εμφανίστηκε σχεδόν στο 50% των κυττάρων.
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 48 έως 72 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
T84 (αριθμός καταλόγου Cytion 300354)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0555

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
Πεπτιδική ορμόνη, νευροδιαβιβαστής
Έκφραση αντιγόνου
Κερατίνη + (χρώση ανοσοϋπεροξειδάσης)
Ισοένζυμα
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Προφίλ μεταλλάξεων
Τα κύτταρα T84 φέρουν ετερόζυγη μετάλλαξη Kras στο κωδικόνιο13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Προϊόντα
Καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο (CEA), 600 ng/ml ανά 10 exp6 κύτταρα ανά 10 ημέρες, κερατίνη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Ham's F12, w: 1,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,1 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820600a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 3
Πυκνότητα σποράς
1 έως 2 × 10⁴ κύτταρα/cm² (διατηρήστε τουλάχιστον το 1/4 της πυκνότητας, ώστε να διατηρηθεί ο φαινότυπος των στενών συνδέσεων)
Ανανέωση υγρών
2 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, μεταφέρετε τα κύτταρα σε τρυβλία με πυκνότητα 5 × 10⁴ κύτταρα/cm² και αφήστε τα να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24–48 ώρες. Διατηρήστε τα κύτταρα σε υψηλή πυκνότητα (≥25% συγκέντρωση) για να εξασφαλίσετε τον σχηματισμό στενών συνδέσεων.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
72 χρόνια
Εθνικότητα
Εθνικότητα μη προσδιορισμένη