Prejsť na obsah
T84
Tkanivo
Colon
Choroba
Karcinóm
Miesto metastáz
Pľúca
Synonymá
T-84, T 84

Dokumenty

T84

Cell line · Číslo výrobku 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
Táto línia vykazuje tesné spojenia a desmozómy medzi susednými bunkami. Bunky by sa mali udržiavať vo vysokej hustote (aspoň 1/4 konfluencie).
Tkanivo
Colon
Choroba
Karcinóm
Miesto metastáz
Pľúca
Aplikácie
Výskum rakoviny hrubého čreva a konečníka; biológia črevného epitelu; štúdie tesných spojení a bariérových funkcií; fyziológia transportu v hrubom čreve; výskum regulátora transmembránovej vodivosti pri cystickej fibróze (CFTR); absorpcia a metabolizmus liekov; modely xenotransplantátov
Synonymá
  • T-84
  • T 84

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelové bunky
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach
Karyotyp
Modálny počet chromozómov v kmeňovej línii je 56 a vyskytuje sa v 28 %, pričom polyploidia predstavuje 12,4 %. Osemnásť markerov je spoločných pre väčšinu skúmaných metafáz. Normálny chromozóm x a chromozóm 13 chýbali, chromozómy 2, 4 a 22 boli jednokopírované a chromozóm 12 bol 4-kopírovaný. pozorovaním Q-pásov nebol zistený žiadny chromozóm Y. DM sa vyskytol v takmer 50 % buniek.
Doba zdvojnásobenia
približne 48 až 72 hodín

04Identifikátory

Citácia
T84 (katalógové číslo Cytion 300354)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0555

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Peptidový hormón, neurotransmiter
Expresia antigénu
Keratín + (farbenie imunoperoxidázou)
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Mutčný profil
Bunky T84 nesú heterozygotnú mutáciu Krasu v kodóne 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Produkty
Karcinoembryonálny antigén (CEA), 600 ng/ml na 10 exp6 buniek za 10 dní, keratín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilný glutamín, w: 1,0 mM pyruvát sodný, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion číslo výrobku 820600a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 2 × 10⁴ buniek/cm² (udržujte aspoň 1/4 konfluencie, aby sa zachoval fenotyp tesných spojení)
Obnova kvapaliny
2 krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky na kultivačné misky v hustote 5 × 10⁴ buniek/cm² a nechajte ich priľnúť aspoň 24–48 hodín. Udržujte bunky vo vysokej hustote (≥25 % konfluencie), aby sa zachovala tvorba tesných spojení.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
72 rokov
Etnická príslušnosť
Etnická príslušnosť nebola uvedená