.jpg)
T84
Cell line · Productnummer 300354
This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).
Maatwerk / Aanbevelingen
- T84Cell line€430.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
- Deze lijn vertoont strakke juncties en desmosomen tussen aangrenzende cellen. De cellen moeten een hoge dichtheid hebben (minstens 1/4 confluentie).
- Weefsel
- Kolon
- Ziekte
- Carcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Long
- Toepassingen
- Onderzoek naar colorectale kanker; biologie van het darmepitheel; onderzoek naar tight junctions en barrièrefuncties; fysiologie van het transport in de dikke darm; onderzoek naar de cystische fibrose-transmembraanconductantieregulator (CFTR); absorptie en metabolisme van geneesmiddelen; xenotransplantaatmodellen
- Synoniemen
- T-84
- T 84
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Man
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- Zonder genetisch gemodificeerde organismen
- Details over de GGO-status
- No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
- Celtype
- Epitheelcellen
- Tumorverwekkend
- Ja, in naakte muizen
- Karyotype
- Het modale chromosoomnummer van de stamlijn is 56, voorkomend bij 28% met polyploïdie bij 12,4%. Achttien markers komen in de meeste onderzochte metafasen voor. Normaal x en chromosoom 13 waren afwezig, chromosomen 2, 4 en 22 waren enkelvoudig gekopieerd en chromosoom 12 was 4-voudig gekopieerd. Er werd geen Y-chromosoom gedetecteerd door Q-band observatie. DM kwam in bijna 50% van de cellen voor.
- Verdubbelingstijd
- ongeveer 48 tot 72 uur
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- T84 (Cytion catalogusnummer 300354)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0555
05Expressie en vatbaarheid
- Tot expressie gebrachte receptoren
- Peptide hormoon, neurotransmitter
- Antigeenexpressie
- Keratine + (Immunoperoxidase kleuring)
- Iso-enzymen
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
- Mutatieprofiel
- T84-cellen dragen een heterozygote Kras-mutatie in codon 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Producten
- Carcinoembryonaal antigeen (CEA), 600 ng/ml per 10 exp6 cellen per 10 dagen, keratine
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabiele Glutamine, w: 1,0 mM natriumpyruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 3
- Zaaidichtheid
- 1 tot 2 × 10⁴ cellen/cm² (zorg ervoor dat de confluentie minimaal 1/4 blijft om het fenotype van de tight junctions te behouden)
- Vloeistofverversing
- 2 keer per week
- Herstel na ontdooiing
- Breng de cellen na het ontdooien uit op een celdichtheid van 5 × 10⁴ cellen/cm² en laat ze minimaal 24–48 uur hechten. Houd de cellen op een hoge dichtheid (≥25% confluentie) om de vorming van tight junctions te behouden.
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- 72 jaar
- Etnische afkomst
- Etnische afkomst niet gespecificeerd
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja