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T84
Pañuelo de papel
Colon
Enfermedad
Carcinoma
Lugar de metástasis
Pulmón
Sinónimos
T-84, T 84

Documentos

T84

Cell line · Número de producto 300354

This line exhibits tight junctions, and desmosomes between adjacent cells. The cells should be maintained at high density (at least 1/4 confluency).

€430.00sin impuestos ni gastos de envío

Personalización / Recomendaciones

En stock
Lote
Recomendado (lote más fresco)
  • CoA
1

01Información general

Descripción
Esta línea presenta uniones estrechas y desmosomas entre las células adyacentes. Las células deben mantenerse a alta densidad (al menos 1/4 de confluencia).
Pañuelo de papel
Colon
Enfermedad
Carcinoma
Lugar de metástasis
Pulmón
Aplicaciones
Investigación sobre el cáncer colorrectal; biología del epitelio intestinal; estudios sobre las uniones estrechas y la función de barrera; fisiología del transporte colónico; investigación sobre el regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR); absorción y metabolismo de fármacos; modelos de xenoinjertos
Sinónimos
  • T-84
  • T 84

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
Sin OGM
Detalles sobre la presencia de OMG
No genetic modification; wildtype colon carcinoma cell line (KRAS G13D heterozygous mutation is an endogenous somatic change, not a genetic engineering modification)
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos
Cariotipo
El número modal de cromosomas de la línea madre es de 56, con un 28% de poliploidía y un 12,4% de poliploidía. Dieciocho marcadores son comunes a la mayoría de las metafases examinadas. El cromosoma X normal y el cromosoma 13 estaban ausentes, los cromosomas 2, 4 y 22 tenían una sola copia y el cromosoma 12 tenía 4 copias. Casi el 50% de las células presentaban DM.
Tiempo de duplicación
entre 48 y 72 horas, aproximadamente

04Identificadores

Referencia
T84 (número de catálogo Cytion 300354)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0555

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Hormona peptídica, neurotransmisor
Expresión de antígenos
Queratina + (tinción de inmunoperoxidasa)
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 1-2, AK-1, 1, GLO-1, 1-2
Perfil mutacional
Las células T84 presentan una mutación heterocigota de Kras en el codón13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Productos
Antígeno carcinoembrionario (CEA), 600 ng/ml por 10 células exp6 por 10 días, queratina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
Ham's F12, w: 1,0 mM Glutamina estable, w: 1,0 mM Piruvato sódico, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion número de artículo 820600a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 3
Densidad de siembra
De 1 a 2 × 10⁴ células/cm² (mantener una confluencia mínima de 1/4 para conservar el fenotipo de las uniones estrechas)
Renovación de fluidos
2 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Tras la descongelación, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se adhieran durante al menos 24-48 horas. Mantenga las células a alta densidad (≥25 % de confluencia) para preservar la formación de uniones estrechas.
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
72 años
Origen étnico
Origen étnico no especificado