Toledo

La lignée cellulaire Toledo est une lignée issue d’un lymphome diffus à grandes cellules B (LDGCB) qui a été initialement établie à partir du sang périphérique d’un patient atteint d’un LDGCB et qui a par la suite développé un lymphome secondaire au niveau du cerveau à la suite d’une chimiothérapie à forte dose et d’une greffe de moelle osseuse. Cette lignée cellulaire présente un caryotype complexe comportant de multiples aberrations chromosomiques, mais ne possède pas les translocations typiques associées au lymphome de Burkitt.

L’une des caractéristiques uniques de la lignée cellulaire Toledo est l’absence d’expression des chaînes polypeptidiques d’immunoglobulines (Ig); elle ne présente pas non plus de segments génétiques détectables de la région constante (C). Malgré cela, Toledo conserve la capacité de subir une hypermutation somatique dans ses segments de gènes variables (V), un phénomène généralement observé dans les cellules B des centres germinatifs. Fait intrigant, Toledo accumule des mutations intraclonales à une fréquence plus élevée que d’autres lignées cellulaires de lymphomes telles que Daudi et Raji, malgré l’absence de mutations clonales significatives. Cela suggère que le processus de mutation pourrait s’être poursuivi in vitro après la transformation, offrant potentiellement un modèle précieux pour l’étude des mécanismes moléculaires de l’hypermutation somatique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.