Toledo

Toledo šūnu līnija ir difūzās lielu B šūnu limfomas (DLBCL) šūnu līnija, kas sākotnēji tika izveidota no DLBCL pacienta perifērās asins, kuram vēlāk pēc augstas devas ķīmijterapijas un kaulu smadzeņu transplantācijas attīstījās sekundāra limfoma smadzenēs. Šai šūnu līnijai ir sarežģīts kariotips ar daudzām hromosomu aberācijām, taču tai nav raksturīgo translokāciju, kas saistītas ar Burkita limfomu.

Viena no Toledo šūnu līnijas unikālajām īpašībām ir imūnglobulīna (Ig) polipeptīda ķēdes ekspresijas trūkums, kā arī nav konstatējami konstanto (C) reģiona gēnu segmenti. Neskatoties uz to, Toledo saglabā spēju veikt somatisko hipermutāciju savos mainīgajos (V) gēnu segmentos — parādība, kas parasti novērojama germinālo centru B šūnās. Interesanti, ka Toledo uzkrāj intraklonālās mutācijas biežāk nekā citas limfomas šūnu līnijas, piemēram, Daudi un Raji, neskatoties uz to, ka tajā nav novērojamas nozīmīgas klonālās mutācijas. Tas liecina, ka mutāciju process, iespējams, ir turpinājies in vitro pēc transformācijas, tādējādi potenciāli piedāvājot vērtīgu modeli somatiskās hipermutācijas molekulāro mehānismu izpētei.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu