Toledo

De Toledo-cellijn is een cellijn van het diffuse grootcellig B-cellymfoom (DLBCL) die oorspronkelijk is geïsoleerd uit het perifere bloed van een patiënt met DLBCL, die later, na hooggedoseerde chemotherapie en beenmergtransplantatie, een secundair lymfoom in de hersenen ontwikkelde. Deze cellijn vertoont een complex karyotype met meerdere chromosomale afwijkingen, maar bezit niet de typische translocaties die geassocieerd worden met het Burkitt-lymfoom.

Een van de unieke kenmerken van de Toledo-cellijn is het ontbreken van expressie van immunoglobuline (Ig)-polypeptideketens, en er zijn ook geen detecteerbare gensegmenten in het constante (C)-gebied aanwezig. Desondanks behoudt Toledo het vermogen om somatische hypermutatie te ondergaan in zijn variabele (V)-gensegmenten, een fenomeen dat doorgaans wordt waargenomen in B-cellen van het kiemcentrum. Opmerkelijk genoeg accumuleert Toledo intraclonale mutaties met een hogere frequentie dan andere lymfoomcellijnen zoals Daudi en Raji, ondanks de afwezigheid van significante klonale mutaties. Dit suggereert dat het mutatieproces zich in vitro na transformatie mogelijk heeft voortgezet, wat mogelijk een waardevol model biedt voor het bestuderen van de moleculaire mechanismen van somatische hypermutatie.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring