Skip to content
Toledo
Tissue
דם היקפי
Disease
לימפומה מפושטת של תאי B גדולים מסוג תאי B במרכז הגרמינלי
Synonyms
TOLEDO

Documents

Toledo

Cell line · Product number 305351

The Toledo cell line is a diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that was originally established from the peripheral blood of a patient with DLBC...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים "טולדו" הוא קו תאים של לימפומה מפושטת של תאי B גדולים (DLBCL), שהוקם במקור מדם היקפי של חולה ב-DLBCL, אשר לימים פיתח לימפומה משנית במוח בעקבות כימותרפיה במינון גבוה והשתלת מח עצם. קו תאים זה מציג קריוטיפ מורכב עם חריגות כרומוזומליות מרובות, אך אינו כולל את הטרנסלוקציות האופייניות הקשורות ללימפומה של בורקיט.

אחת התכונות הייחודיות של קו התאים טולדו היא היעדר ביטוי של שרשרת הפוליפפטיד של אימונוגלובולין (Ig), וכן היעדר קטעי גנים ניתנים לזיהוי באזור הקבוע (C). למרות זאת, Toledo שומר על היכולת לעבור היפרמוטציה סומטית בקטעי הגן המשתנים (V) שלו, תופעה הנצפית בדרך כלל בתאי B במרכז הגרמינלי. מעניין לציין כי קו התאים טולדו צובר מוטציות תוך-קלונליות בתדירות גבוהה יותר מאשר קווי תאים אחרים של לימפומה, כגון דאודי (Daudi) וראג'י (Raji), למרות היעדרן של מוטציות קלונליות משמעותיות. דבר זה מצביע על כך שתהליך המוטציה עשוי היה להימשך במבחנה לאחר הטרנספורמציה, ובכך להציע מודל בעל ערך לחקר המנגנונים המולקולריים של היפרמוטציה סומטית.

Tissue
דם היקפי
Disease
לימפומה מפושטת של תאי B גדולים מסוג תאי B במרכז הגרמינלי
Applications
תרבות תאים תלת-ממדית, אימונולוגיה
Synonyms
  • TOLEDO

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
לימפוציט
Doubling time
50 שעות

04Identifiers

Citation
טולדו (מספר קטלוג Cytion 305351)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_3611

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CD10+, CD19+, CD20+, CD38+, CD23-, CD39-
Mutational profile
מוטציה: KRAS, פשוטה, p.Gly13Asp (c.38G>A), הטרוזיגוטית; מוטציה: TP53, פשוטה, p.Glu198fs (c.592_596del5), לא צוין
Viruses
EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HTLV-1/2-, MLV-, SMRV-

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אף אחד
Subculturing
שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 5 x 105 תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 3 x 105 עד 1 x 106 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
Seeding density
2 עד 4 × 10⁵ תאים/מ"ל
Fluid renewal
כל 2-3 ימים
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
מבוגר
Ethnicity
קווקזי