Toledo

トレド細胞株は、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫（DLBCL）の細胞株であり、当初、DLBCL患者の末梢血から樹立されたものである。この患者はその後、高用量化学療法および骨髄移植を受けた後に、脳に二次性リンパ腫を発症した。 この細胞株は、複数の染色体異常を伴う複雑な核型を示すが、バーキットリンパ腫に典型的な転座は認められない。

トレド細胞株の独特な特徴の一つは、免疫グロブリン（Ig）ポリペプチド鎖の発現がないことであり、また、検出可能な定常（C）領域の遺伝子セグメントも欠如しています。 それにもかかわらず、Toledo は、胚中心 B 細胞で典型的に観察される現象である、可変（V）遺伝子断片における体細胞超変異を起こす能力を保持している。 興味深いことに、トレドは、有意なクローン性変異を認めないにもかかわらず、ダウディやラジなどの他のリンパ腫細胞株よりも高い頻度でクローン内変異を蓄積する。これは、形質転換後も体外で変異過程が継続していた可能性を示唆しており、体細胞超変異の分子メカニズムを研究するための貴重なモデルとなり得る。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。