Toledo

Toledo-cellelinjen er en cellelinje for diffust storcellet B-celle-lymfom (DLBCL) som opprinnelig ble etablert fra perifert blod fra en pasient med DLBCL, som senere utviklet et sekundært lymfom i hjernen etter høydose kjemoterapi og benmargstransplantasjon. Denne cellelinjen har et komplekst karyotype med flere kromosomavvik, men har ikke de typiske translokasjonene som er forbundet med Burkitts lymfom.

Et av de unike kjennetegnene ved Toledo-cellelinjen er mangelen på ekspresjon av immunoglobulin (Ig)-polypeptidkjeder, og den mangler også påvisbare gensegmenter i den konstante (C) regionen. Til tross for dette beholder Toledo evnen til å gjennomgå somatisk hypermutasjon i sine variable (V) gensegmenter, et fenomen som vanligvis observeres i B-celler i germinalsenteret. Interessant nok akkumulerer Toledo intraklonale mutasjoner med høyere frekvens enn andre lymfomcellelinjer som Daudi og Raji, til tross for fraværet av signifikante klonale mutasjoner. Dette tyder på at mutasjonsprosessen kan ha fortsatt in vitro etter transformasjonen, noe som potensielt gir en verdifull modell for å studere de molekylære mekanismene bak somatisk hypermutasjon.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring