Toledo

سلسلة خلايا توليدو هي سلسلة خلايا لليمفوما الكبيرة المنتشرة من الخلايا البائية (DLBCL)، وقد تم إنشاؤها في الأصل من الدم المحيطي لمريض مصاب بـ DLBCL، والذي أصيب لاحقًا بليمفوما ثانوية في الدماغ عقب خضوعه لعلاج كيميائي بجرعات عالية وزرع نخاع العظم. يُظهر هذا الخط الخلوي نمطًا كروموسوميًّا معقدًا يتضمن انحرافات كروموسومية متعددة، لكنه لا يحتوي على عمليات الانتقال الكروموسومي النموذجية المرتبطة بليمفوما بوركيت.

تتمثل إحدى الخصائص الفريدة لسلسلة خلايا توليدو في عدم وجود تعبير عن سلسلة البولي ببتيد للغلوبولين المناعي (Ig)، كما أنها تفتقر إلى شرائح جينية قابلة للكشف في المنطقة الثابتة (C). ورغم ذلك، يحتفظ «توليدو» بالقدرة على الخضوع لفرط الطفرات الجسدية في شرائح جيناته المتغيرة (V)، وهي ظاهرة تُلاحظ عادةً في خلايا B في المركز الجرثومي. ومن المثير للاهتمام أن خط توليدو يتراكم فيه الطفرات داخل المستنسخ بتواتر أعلى مقارنة بخطوط الخلايا الليمفومية الأخرى مثل داودي وراجي، على الرغم من غياب الطفرات المستنسخية ذات الأهمية. ويشير هذا إلى أن عملية الطفرة ربما استمرت في المختبر بعد التحول، مما قد يوفر نموذجًا قيمًا لدراسة الآليات الجزيئية للتحور الجسدي المفرط.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان