Toledo

Die Toledo-Zelllinie ist eine Zelllinie des diffusen großzelligen B-Zell-Lymphoms (DLBCL), die ursprünglich aus dem peripheren Blut eines Patienten mit DLBCL gewonnen wurde, bei dem sich nach einer hochdosierten Chemotherapie und einer Knochenmarktransplantation später ein sekundäres Lymphom im Gehirn entwickelte. Diese Zelllinie weist einen komplexen Karyotyp mit mehreren Chromosomenaberrationen auf, besitzt jedoch nicht die für das Burkitt-Lymphom typischen Translokationen.

Eines der einzigartigen Merkmale der Toledo-Zelllinie ist das Fehlen der Expression von Immunglobulin (Ig)-Polypeptidketten; zudem fehlen nachweisbare Gensegmente der konstanten (C-)Region. Trotzdem behält Toledo die Fähigkeit bei, in seinen variablen (V)-Gensegmenten eine somatische Hypermutation zu durchlaufen – ein Phänomen, das typischerweise in B-Zellen des Keimzentrums beobachtet wird. Interessanterweise akkumuliert Toledo intraklonale Mutationen mit einer höheren Frequenz als andere Lymphomzelllinien wie Daudi und Raji, obwohl keine signifikanten klonalen Mutationen vorliegen. Dies deutet darauf hin, dass der Mutationsprozess nach der Transformation in vitro fortgesetzt worden sein könnte, was potenziell ein wertvolles Modell für die Untersuchung der molekularen Mechanismen der somatischen Hypermutation darstellt.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung