Toledo

Toledo hücre hattı, başlangıçta DLBCL’li bir hastanın periferik kanından elde edilen, daha sonra yüksek doz kemoterapi ve kemik iliği nakli sonrasında beyinde ikincil bir lenfoma gelişen bir diffüz büyük B hücreli lenfoma (DLBCL) hücre hattıdır. Bu hücre hattı, çok sayıda kromozomal aberasyon içeren karmaşık bir karyotip sergilemektedir ancak Burkitt lenfomasıyla ilişkili tipik translokasyonlara sahip değildir.

Toledo hücre hattının benzersiz özelliklerinden biri, immünoglobulin (Ig) polipeptit zinciri ekspresyonunun olmamasıdır; ayrıca saptanabilir sabit (C) bölge gen segmentleri de bulunmamaktadır. Buna rağmen Toledo, germinal merkez B hücrelerinde tipik olarak gözlenen bir fenomen olan değişken (V) gen segmentlerinde somatik hipermutasyona uğrama yeteneğini korur. İlginç bir şekilde, Toledo, önemli klonal mutasyonların olmamasına rağmen, Daudi ve Raji gibi diğer lenfoma hücre hatlarına kıyasla daha yüksek sıklıkta intraklonal mutasyonlar biriktirmektedir. Bu durum, mutasyon sürecinin transformasyondan sonra in vitro olarak devam etmiş olabileceğini düşündürmekte ve somatik hipermutasyonun moleküler mekanizmalarını incelemek için potansiyel olarak değerli bir model sunmaktadır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın