Toledo

Toledo-cellinjen är en cellinje av typen diffust storcelligt B-cellslymfom (DLBCL) som ursprungligen etablerades från perifert blod hos en patient med DLBCL, vilken senare utvecklade ett sekundärt lymfom i hjärnan efter högdoskemoterapi och benmärgstransplantation. Denna cellinje uppvisar en komplex karyotyp med flera kromosomavvikelser men saknar de typiska translokationer som är förknippade med Burkitts lymfom.

Ett av de unika kännetecknen för Toledo-cellinjen är avsaknaden av uttryck av immunoglobulin (Ig)-polypeptidkedjor, och den saknar även detekterbara gensegment i den konstanta (C)-regionen. Trots detta behåller Toledo förmågan att genomgå somatisk hypermutation i sina variabla (V) gensegment, ett fenomen som vanligtvis observeras i B-celler i germinalcentra. Intressant nog ackumulerar Toledo intraklonala mutationer med högre frekvens än andra lymfomcellinjer, såsom Daudi och Raji, trots avsaknaden av signifikanta klonala mutationer. Detta tyder på att mutationsprocessen kan ha fortsatt in vitro efter transformationen, vilket potentiellt erbjuder en värdefull modell för att studera de molekylära mekanismerna bakom somatisk hypermutation.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring