Toledo

La linea cellulare Toledo è una linea cellulare derivata da un linfoma diffuso a grandi cellule B (DLBCL), originariamente isolata dal sangue periferico di un paziente affetto da DLBCL che, in seguito a chemioterapia ad alte dosi e trapianto di midollo osseo, ha sviluppato un linfoma secondario a livello cerebrale. Questa linea cellulare presenta un cariotipo complesso con molteplici aberrazioni cromosomiche, ma non possiede le traslocazioni tipiche associate al linfoma di Burkitt.

Una delle caratteristiche uniche della linea cellulare Toledo è la mancanza di espressione delle catene polipeptidiche delle immunoglobuline (Ig); inoltre, non presenta segmenti genici rilevabili della regione costante (C). Nonostante ciò, Toledo conserva la capacità di subire ipermutazione somatica nei propri segmenti genici variabili (V), un fenomeno tipicamente osservato nelle cellule B dei centri germinativi. È interessante notare che Toledo accumula mutazioni intraclonali con una frequenza maggiore rispetto ad altre linee cellulari di linfoma, quali Daudi e Raji, nonostante l’assenza di mutazioni clonali significative. Ciò suggerisce che il processo mutazionale possa essere proseguito in vitro dopo la trasformazione, offrendo potenzialmente un modello prezioso per lo studio dei meccanismi molecolari dell’ipermutazione somatica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia