Перейти до вмісту
Toledo
Тканина
Периферична кров
Хвороба
Дифузна велика В-клітинна лімфома з зародковим центром В-клітинного типу
Синоніми
TOLEDO

Документи

Toledo

Cell line · Номер товару 305351

The Toledo cell line is a diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that was originally established from the peripheral blood of a patient with DLBC...

€800.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія «Толедо» — це клітинна лінія дифузної великоклітинної В-клітинної лімфоми (DLBCL), яка була спочатку отримана з периферичної крові пацієнта з DLBCL, у якого пізніше, після високодозової хіміотерапії та трансплантації кісткового мозку, розвинулася вторинна лімфома головного мозку. Ця клітинна лінія має складний каріотип із численними хромосомними абераціями, але не має типових транслокацій, пов’язаних із лімфомою Беркітта.

Однією з унікальних характеристик клітинної лінії «Толедо» є відсутність експресії поліпептидних ланцюгів імуноглобуліну (Ig), а також відсутність виявляємих сегментів генів постійної (C) області. Незважаючи на це, «Toledo» зберігає здатність до соматичної гіпермутації у своїх варіабельних (V) сегментах генів — явища, яке зазвичай спостерігається у В-клітинах зародкових центрів. Цікаво, що «Toledo» накопичує внутрішньоклональні мутації з вищою частотою, ніж інші клітинні лінії лімфоми, такі як «Daudi» та «Raji», незважаючи на відсутність значних клональних мутацій. Це свідчить про те, що процес мутації, ймовірно, продовжувався in vitro після трансформації, що потенційно надає цінну модель для вивчення молекулярних механізмів соматичної гіпермутації.

Тканина
Периферична кров
Хвороба
Дифузна велика В-клітинна лімфома з зародковим центром В-клітинного типу
Застосування
3D-культура клітин, Імунологія
Синоніми
  • TOLEDO

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Підвіска
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Лімфобласт
Час подвоєння
50 годин

04Ідентифікатори

Посилання
Толедо (номер у каталозі Cytion 305351)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_3611

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
CD10+, CD19+, CD20+, CD38+, CD23-, CD39-
Профіль мутацій
Мутація: KRAS, проста, p.Gly13Asp (c.38G>A), гетерозиготна; Мутація: TP53, проста, p.Glu198fs (c.592_596del5), неспецифікована
Віруси
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Ні
Пересадка в нове середовище
Підтримуйте культури, періодично додаючи або замінюючи середовище. Починайте культури з щільністю 5 x 105 клітин/мл і підтримуйте концентрацію клітин в діапазоні від 3 x 105 до 1 x 106 клітин/мл для оптимального росту.
Щільність висіву
від 2 до 4 × 10⁵ клітин/мл
Оновлення рідини
Кожні 2-3 дні
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Дорослий
Етнічна приналежність
Кавказець