Toledo

Celična linija Toledo je celična linija difuznega velikoceličnega B-celičnega limfoma (DLBCL), ki je bila prvotno vzpostavljena iz periferne krvi bolnika z DLBCL, pri katerem se je po visokodozni kemoterapiji in presaditvi kostnega mozga kasneje razvil sekundarni limfom v možganih. Ta celična linija kaže kompleksen kariotip z več kromosomskimi aberacijami, vendar nima tipičnih translokacij, povezanih z Burkittovim limfomom.

Ena od edinstvenih značilnosti celične linije Toledo je odsotnost ekspresije polipeptidne verige imunoglobulina (Ig), prav tako pa ji manjkajo zaznavni geni v konstantnem (C) območju. Kljub temu Toledo ohranja sposobnost somatske hipermutacije v svojih spremenljivih (V) genskih segmentih, pojav, ki se običajno opazuje v B-celicah germinalnega centra. Zanimivo je, da se v liniji Toledo nakopičijo intraklonalne mutacije z višjo frekvenco kot v drugih limfomskih celičnih linijah, kot sta Daudi in Raji, kljub odsotnosti pomembnih klonalnih mutacij. To kaže, da se je proces mutacij morda nadaljeval in vitro po transformaciji, kar potencialno ponuja dragocen model za preučevanje molekularnih mehanizmov somatske hipermutacije.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo