Toledo

Toledo rakuliin on difuusne suurte B-rakkude lümfoomi (DLBCL) rakuliin, mis loodi algselt DLBCL-i põdeva patsiendi perifeersest verest, kellel tekkis hiljem pärast suure annusega keemiaravi ja luuüdi siirdamist sekundaarne lümfoom ajus. Sellel rakuliinil on keerukas kariotüüp, milles esineb mitmeid kromosoomianomaaliaid, kuid sellel puuduvad Burkitti lümfoomiga seotud tüüpilised translokatsioonid.

Toledo rakuliini üks unikaalne omadus on immunoglobuliini (Ig) polüpeptiidahela ekspressiooni puudumine ning samuti puuduvad sellel tuvastatavad konstantse (C) piirkonna geenisegmendid. Sellest hoolimata säilitab Toledo võime läbida somaatilist hüpermutatsiooni oma muutuvates (V) geenisegmentides – nähtus, mida tavaliselt täheldatakse germinaalkeskuse B-rakkudes. Huvitaval kombel kogunevad Toledos intrakloonaalsed mutatsioonid sagedamini kui teistes lümfoomi rakuliinides, nagu Daudi ja Raji, hoolimata märkimisväärsete kloonaalsete mutatsioonide puudumisest. See viitab sellele, et mutatsiooniprotsess võis pärast transformatsiooni in vitro jätkuda, pakkudes potentsiaalselt väärtuslikku mudelit somaatilise hüpermutatsiooni molekulaarsete mehhanismide uurimiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest