Toledo

สายเซลล์ Toledo เป็นสายเซลล์ของมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดเซลล์บีขนาดใหญ่แบบแพร่กระจาย (DLBCL) ซึ่งถูกสร้างขึ้นครั้งแรกจากเลือดส่วนปลายของผู้ป่วยที่เป็น DLBCL ซึ่งต่อมาเกิดมะเร็งต่อมน้ำเหลืองทุติยภูมิในสมอง หลังจากได้รับการรักษาด้วยเคมีบำบัดขนาดสูงและการปลูกถ่ายไขกระดูก สายเซลล์นี้แสดงแบบโครโมโซมที่ซับซ้อนพร้อมความผิดปกติของโครโมโซมหลายแห่ง แต่ไม่มีแบบการสลับตำแหน่งโครโมโซม (translocations) ที่มักพบในโรคมะเร็งต่อมน้ำเหลืองแบบเบอร์คิตต์ (Burkitt’s lymphoma)

หนึ่งในลักษณะเฉพาะของสายเซลล์ Toledo คือการไม่แสดงออกของสายโพลีเปปไทด์อิมมูโนโกลบูลิน (Ig) และไม่พบส่วนยีนของภูมิภาคคงที่ (C) ที่สามารถตรวจพบได้ แม้ demikian Toledo ยังคงมีความสามารถในการเกิดการไฮเปอร์มิวเทชันแบบโซมาติกในส่วนยีนแปรผัน (V) ซึ่งเป็นปรากฏการณ์ที่มักพบในเซลล์บีของศูนย์กำเนิด ที่น่าสนใจคือ Toledo สะสมการกลายพันธุ์ภายในคลอน (intraclonal mutations) ด้วยความถี่ที่สูงกว่าสายเซลล์ลิมโฟมาอื่น ๆ เช่น Daudi และ Raji แม้ว่าจะไม่มีการกลายพันธุ์คลอน (clonal mutations) ที่สำคัญก็ตาม สิ่งนี้ชี้ให้เห็นว่ากระบวนการกลายพันธุ์อาจยังคงดำเนินต่อไปในหลอดทดลอง (in vitro) หลังจากการแปลงสภาพ (transformation) ซึ่งอาจให้แบบจำลองที่มีค่าสำหรับการศึกษาเชิงกลไกโมเลกุลของการกลายพันธุ์แบบโซมาติกไฮเปอร์มิวเทชัน

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.