Langsung ke isi
Toledo
Tisu
Darah tepi
Penyakit
Limfoma sel B besar yang menyebar di pusat germinal tipe sel B
Sinonim
TOLEDO

Toledo

Cell line · Nomor produk 305351

The Toledo cell line is a diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that was originally established from the peripheral blood of a patient with DLBC...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Baris sel Toledo adalah baris sel limfoma sel B besar difus (DLBCL) yang awalnya diisolasi dari darah tepi seorang pasien dengan DLBCL yang kemudian mengalami limfoma sekunder di otak setelah menjalani kemoterapi dosis tinggi dan transplantasi sumsum tulang. Baris sel ini menunjukkan kariotipe yang kompleks dengan berbagai kelainan kromosom, namun tidak memiliki translokasi khas yang terkait dengan limfoma Burkitt.

Salah satu karakteristik unik dari garis sel Toledo adalah tidak adanya ekspresi rantai polipeptida imunoglobulin (Ig), dan juga tidak adanya segmen gen daerah konstan (C) yang terdeteksi. Meskipun demikian, Toledo tetap memiliki kemampuan untuk mengalami hipermutasi somatik pada segmen gen variabel (V)-nya, sebuah fenomena yang biasanya diamati pada sel B pusat germinal. Menariknya, Toledo mengakumulasi mutasi intraklonal dengan frekuensi yang lebih tinggi daripada garis sel limfoma lainnya seperti Daudi dan Raji, meskipun tidak terdapat mutasi klonal yang signifikan. Hal ini menunjukkan bahwa proses mutasi mungkin telah berlanjut secara in vitro setelah transformasi, yang berpotensi menjadi model berharga untuk mempelajari mekanisme molekuler hipermutasi somatik.

Tisu
Darah tepi
Penyakit
Limfoma sel B besar yang menyebar di pusat germinal tipe sel B
Aplikasi
kultur sel 3D, Imunologi
Sinonim
  • TOLEDO

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Penangguhan
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Limfoblas
Waktu penggandaan
50 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
Toledo (nomor katalog Cytion 305351)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3611

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
CD10+, CD19+, CD20+, CD38+, CD23-, CD39-
Profil mutasi
Mutasi: KRAS, Sederhana, p.Gly13Asp (c.38G>A), Heterozigot; Mutasi: TP53, Sederhana, p.Glu198fs (c.592_596del5), Tidak ditentukan
Virus
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Tidak ada
Perbanyakan sel
Pertahankan kultur dengan secara berkala menambahkan atau mengganti medium. Mulailah kultur dengan kepadatan 5 x 10⁵ sel/ml dan jaga konsentrasi sel dalam rentang 3 x 10⁵ hingga 1 x 10⁶ sel/ml untuk pertumbuhan optimal.
Kepadatan penanaman
2 hingga 4 × 10⁵ sel/ml
Pergantian cairan
Setiap 2 hingga 3 hari
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Dewasa
Etnis
Kaukasia