Pereiti prie turinio
Toledo
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Difuzinė stambiųjų B ląstelių limfoma germinacinio centro B ląstelių tipas
Sinonimai
TOLEDO

Dokumentai

Toledo

Cell line · Prekės numeris 305351

The Toledo cell line is a diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that was originally established from the peripheral blood of a patient with DLBC...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Toledo ląstelių linija yra difuzinės didelių B ląstelių limfomos (DLBCL) ląstelių linija, kuri iš pradžių buvo išskirta iš DLBCL sergančio paciento periferinio kraujo; vėliau, po didelės dozės chemoterapijos ir kaulų čiulpų transplantacijos, šiam pacientui smegenyse išsivystė antrinė limfoma. Ši ląstelių linija pasižymi sudėtingu kariotipu su daugybe chromosomų aberacijų, tačiau neturi tipinių translokacijų, susijusių su Burkitto limfoma.

Viena iš unikalių Toledo ląstelių linijos savybių – imunoglobulino (Ig) polipeptidinės grandinės ekspresijos nebuvimas, taip pat joje nėra aptinkamų pastoviosios (C) srities genų segmentų. Nepaisant to, „Toledo“ išlaiko gebėjimą patirti somatinę hipermutaciją savo kintamuosiuose (V) genų segmentuose – reiškinį, paprastai stebimą germinalinių centrų B ląstelėse. Įdomu tai, kad „Toledo“ linija kaupia intraklonines mutacijas dažniau nei kitos limfomos ląstelių linijos, pavyzdžiui, „Daudi“ ir „Raji“, nepaisant to, kad joje nėra reikšmingų kloninių mutacijų. Tai leidžia manyti, kad mutacijų procesas galėjo tęstis in vitro po transformacijos, o tai potencialiai suteikia vertingą modelį somatinės hipermutacijos molekulinių mechanizmų tyrimams.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Difuzinė stambiųjų B ląstelių limfoma germinacinio centro B ląstelių tipas
Paraiškos
3D ląstelių kultūra, Imunologija
Sinonimai
  • TOLEDO

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Limfoblastai
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
50 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
Toledo (Cytion katalogo numeris 305351)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_3611

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
CD10+, CD19+, CD20+, CD38+, CD23-, CD39-
Mutacijų profilis
Mutacija: KRAS, paprasta, p.Gly13Asp (c.38G>A), heterozigotinė; Mutacija: TP53, paprasta, p.Glu198fs (c.592_596del5), nenurodyta
Virusai
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Nėra
Subkultūrinis auginimas
Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 5 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 3 x 105 iki 1 x 106 ląstelių/ml.
Sėjos tankis
2–4 × 10⁵ ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
Kas 2-3 dienas
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Suaugusiųjų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių