
- Audinys
- Periferinis kraujas
- Liga
- Difuzinė stambiųjų B ląstelių limfoma germinacinio centro B ląstelių tipas
- Sinonimai
- TOLEDO
Dokumentai
Toledo
Cell line · Prekės numeris 305351
The Toledo cell line is a diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that was originally established from the peripheral blood of a patient with DLBC...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- ToledoCell line€800.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
Toledo ląstelių linija yra difuzinės didelių B ląstelių limfomos (DLBCL) ląstelių linija, kuri iš pradžių buvo išskirta iš DLBCL sergančio paciento periferinio kraujo; vėliau, po didelės dozės chemoterapijos ir kaulų čiulpų transplantacijos, šiam pacientui smegenyse išsivystė antrinė limfoma. Ši ląstelių linija pasižymi sudėtingu kariotipu su daugybe chromosomų aberacijų, tačiau neturi tipinių translokacijų, susijusių su Burkitto limfoma.
Viena iš unikalių Toledo ląstelių linijos savybių – imunoglobulino (Ig) polipeptidinės grandinės ekspresijos nebuvimas, taip pat joje nėra aptinkamų pastoviosios (C) srities genų segmentų. Nepaisant to, „Toledo“ išlaiko gebėjimą patirti somatinę hipermutaciją savo kintamuosiuose (V) genų segmentuose – reiškinį, paprastai stebimą germinalinių centrų B ląstelėse. Įdomu tai, kad „Toledo“ linija kaupia intraklonines mutacijas dažniau nei kitos limfomos ląstelių linijos, pavyzdžiui, „Daudi“ ir „Raji“, nepaisant to, kad joje nėra reikšmingų kloninių mutacijų. Tai leidžia manyti, kad mutacijų procesas galėjo tęstis in vitro po transformacijos, o tai potencialiai suteikia vertingą modelį somatinės hipermutacijos molekulinių mechanizmų tyrimams.
- Audinys
- Periferinis kraujas
- Liga
- Difuzinė stambiųjų B ląstelių limfoma germinacinio centro B ląstelių tipas
- Paraiškos
- 3D ląstelių kultūra, Imunologija
- Sinonimai
- TOLEDO
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Pakaba
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Limfoblastai
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- 50 valandų
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- Toledo (Cytion katalogo numeris 305351)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3611
05Išraiška ir jautrumas
- Antigeno ekspresija
- CD10+, CD19+, CD20+, CD38+, CD23-, CD39-
- Mutacijų profilis
- Mutacija: KRAS, paprasta, p.Gly13Asp (c.38G>A), heterozigotinė; Mutacija: TP53, paprasta, p.Glu198fs (c.592_596del5), nenurodyta
- Virusai
- EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS
- Disociacijos reagentas
- Nėra
- Subkultūrinis auginimas
- Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 5 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 3 x 105 iki 1 x 106 ląstelių/ml.
- Sėjos tankis
- 2–4 × 10⁵ ląstelių/ml
- Skysčių atnaujinimas
- Kas 2-3 dienas
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- Suaugusiųjų
- Etninė priklausomybė
- Kaukaziečių
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip